人脾脏T,B淋巴细胞亚群及其分布的免疫组织化学研究.pdfVIP

维普资讯 第21卷 第 1期 解 剖 学 报 V0i．2I，No 1 l990 年 1月 ACTA ANAT0M 1CA SINICA Jan． 1990 ‘ ． 人脾脏T、B淋巴细胞亚群及其 。 分布的免疫组织化学研究 葛振华 王菩愚 林忠清 (福建省中医药研究所，福州 35ooo3) 抽要 本文用多种单克隆抗体 ，对 5例jE常人和2例门静脉高压患者的脾 脏T、B淋巴细胞及 其亚群的分布进行 了研究。结果证明，T细胞大多集 中在动脉周围淋巴鞘 ，其中也 杂有少数 B淋 巴细胞。淋巴滤泡主要 由B细胞构成，但也含有少量曲T细胞，如Lea1、Leu3a和Leu4等用 性细胞 ，这些 T细胞对于谴拖船彤成是必需曲。边绿区是T、B淋 巴细胞的混 合医，其中也包括 T 阳性B细胞。脾脏红髓也是 T、B细胞的混合区，这些细胞的分布无一定 规 律。此外，本 文 用 LN一2抗体研究了脾脏的B淋巴细胞，它是唯一与 B细胞棱膜起反应的抗体，其活性不受B一5固 定和有蜡包埋的影响。本文资料表明．门哧高压病人脾脏内的T、B细胞的染色反应和分布特征， 与正常人无明显区别 ，但淋巴鞘似比正常人略有狭窄。 关键词 单克隆抗俸 T，B淋 巴细胞亚群 牌边缘区 免癌组织化学 免疫组织化学和酶组织化学的方法 ，在 70年代 曾被用于研究脾脏 自髓 内T，B淋巴细 胞的分布 。M~ller—Hermelink等 证明人的脾脏 EAC(红细胞抗体补体)阳性区与某些淋 巴 细胞有一定的关系，这些细胞膜表面有 ～核苷酸酶和 ATP酶的活性 他们还指出，淋巴结内 B细胞区(初级和次级滤泡)也具有上述EAC和酶的反应 。后来用人 T、B淋 巴细胞抗体， 也证明了过去组织化学的结论，再次肯定动脉周围淋巴鞘为 T细胞分布区，而 淋 巴滤泡则 为 B细胞分布区 ’3。近年来，由于制成多种单克隆抗体，故有可能在组织切片上观察T、B 淋 巴细胞及其亚群的分布，以及它们之闯的相互关系。利用单克隆抗体研究淋巴结 、扁桃体、 胸腺和小肠的淋巴细胞亚群的分布，虽然有过许多报道 ，但对人脾 脏内T、B淋巴细胞 及其亚群的分布研究并不多。为此，我们用多种单克隆抗体，观察了人脾脏 内，特别是 自髓 内淋 巴细胞的分布及其相互关系 材 料 和 方 法 (一)材料：7例人的脾脏，其中2例取 自门静脉高压手术的病人，其 余 5倒为正常人 脾脏 。离体后 45分钟内，将脾脏切成小块，一部分用异戊烷和液氮进行快 速 {孥冻，用于冰 冻切片。另一部分用 B一5固定渡 7【(氯化汞 6g、无水醋酸钠1．25g、蒸馏水 9OmI，』临用前 加4O％甲醛 10m1)固定。冰冻切片用 3％羧 甲基纤维素(carboxymethylcellulose)包埋，恒 温冷冻切片机切片，厚 5ttm， 后将切片置于用明胶处理过的玻片上，放 4℃冰箱 内备用 B一5固定的组织置 4oC冰箱，固定 24小时，按常规脱水包埋，石蜡切片厚 5ttm (二)试剂：T、B淋巴细胞的单克隆抗体如附表，生物素标记的马抗小 鼠IgG抗体和 南京军区福州军医学控 维普资讯 88 解 附表 单克隆抗体对^淋巴组织反应的特征_厦部位 抗 体 特 异 性 1 来 瓣 LeuI 朐腺细胞95 阳性，外周血72％T细胞阳性 lBect0ⅡDickingon产品 Leu2a 外周血28 抑制T细胞阳性 鹪隙姐胞60~85 船性 l Bec0【n ck g0n产品 LeⅡ3a 卦周血 45 辅助 T细胞阳性，胸隙细胞 8O～95％ 阳性 { BeetotxDiekir,~r,产品 Leu4 外