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食品安全检测中固相萃取技术的应用及技巧 美华科技实业有限公司 美森自动化技术有限公司 陈小华 摘要：本文阐述了食品安全检测中固相萃取技术应用中需要注意的几个环节，特 别强调了pH 及log Kow 在固相萃取中的作用。并介绍了食品检测中固相萃取设 备的最新进展。 样品前处理作为食品安全分析的一个必不可少的步骤，其重要性越来越多地 得到人们的重视。样品前处理的好坏会直接影响最后的分析结果[1]。而样品前 处理中的一个重要分支 — 固相萃取已经被广泛地应用。我国许多食品安全检测 国标方法中都采用固相萃取作为样品萃取或净化手段。作为一种成熟、稳定的样 品前处理技术，固相萃取已经在我国许多食品安全检测实验室广为使用。 固相萃取技术在食品安全检测中的主要目的是： 将目标化合物从复杂的样品基质中分离出来； 尽可能地除去对目标化合物分析产生干扰的化合物； 将目标化合物转移到分析仪器能够接受的介质中； 并对样品进行浓缩，以保证其浓度在仪器的检出限以上。 根据萃取模式，固相萃取可分为目标化合物吸附模式和杂质吸附模式。如图 1 所示，在目标化合物吸附模式中，SPE 柱（膜片）主要用于从样品基质中吸附 待检测化合物。例如，从乳液中萃取三聚氰胺[2]。而杂质吸附模式（见图2 ）则 主要用于净化有机萃取液，萃取有机液经过SPE 柱（膜片），杂质被吸附，而 目标化合物则没有保留地通过SPE 柱（膜片）[3]。 图1. 目标化合物吸附模式。 图2. 杂质吸附模式。 1 虽然固相萃取技术已经广泛地应用于食品安全检测中的样品前处理，其步骤也不 复杂，但是要真正应用好这项技术，除了要掌握解固相萃取的基本机理外，还需 要对影响固相萃取的因素进行综合考虑，这样才能最大限度地发挥固相萃取在食 品安全检测中的作用。除了必要的理论知识外，正确地选择和使用固相萃取仪器 设备也是许多实验室面对的挑战。能否向用户提供符合实验室要求的固相萃取设 备，对于仪器生产商而言，也是一个挑战。 一、固相萃取应用中值得注意的若干问题 1、pH 在固相萃取中的作用 食品检测中的许多目标化合物均为弱酸性或弱碱性化合物，例如有机农药、 兽药等。在对这些在一定pH 条件下可形成带电荷，离子或可呈中性状态的化合 物，其本身的理化性质在决定固相萃取材料的选择、吸附条件、洗脱条件至关重 要。对于这些可离子化的目标化合物的固相萃取，pKa 是一个重要的参数。根据 化合物的pKa ，可以选择固相萃取的吸附及洗脱时的环境pH 值，以达到最佳的 吸附及洗脱效果。一下公式反映出pH 与化合物pKa 及其离子浓度和中性化浓度 之间的关系。 根据以上公式，可以总结出2 个pH 单位的原则： 表1、弱酸性/弱碱性化合物pKa 与pH 的关系 化合物类型 低于pKa 2 个pH 单位 高于pKa 2 个pH 单位 弱酸性 99% 中性状态 99% 阴离子状态 弱碱性 99% 阳离子状态 99% 中性状态 由表1 可见，对于弱酸性化合物，在采用阴离子交换固相萃取时，吸附过程 环境的pH 应该高于该化合物pKa 2 个pH 单位，洗脱时应该低于pKa 2 个pH 单 位；对于弱碱性化合物则相反。以盐酸克伦特罗为例，其pKa = 9.6 。在采用阳 离子交换固相萃取时，吸附（样品过柱）时的pH 应该至少低于该化合物pKa 2 个pH 单位，即pH ≤ 7.6 ，在该pH 条件下，99%的克伦特罗呈阳离子状态，被 阳离子交换固相萃取柱吸附。而在洗脱时，pH 应该至少高于pKa 2 个pH 单位， 2 即 pH ≥ 11.6 ，99%的克伦特罗呈中性状态，与固相萃取材料的阳离子交换官 能团分离