硝基芳烃对虹鳉鱼(Poecilia reticulata) 的毒性.docVIP

硝基芳烃对虹鳉鱼（Poecilia reticulata）的毒性 张 蕾，徐镜波 东北师范大学环境科学与工程系，吉林 长春 130024 摘要：主要研究了2,6-二硝基甲苯（2,6-DNT）和4-硝基甲苯（4-NT）两种硝基芳烃对虹鳉鱼的急性毒性、亚急性毒性及联合毒性效应，旨在为渔业水质标准的制定与完善提供可靠的科学依据。研究表明，2,6-DNT的急性毒性大于4-NT，二者的96 h LC50值分别为（25.22±0.19）mg/L和（60.26±0.09）mg/L；亚急性毒性研究中，两种化合物的各种质量浓度在40天内，对试验动物的生长有不同程度的影响；应用Marking相加指数法评价二者的联合毒性，结果表明其联合毒性为协同。 关键词：2,6-二硝基甲苯；4-硝基甲苯；虹鳉鱼；急性毒性；亚急性毒性；联合毒性 中图分类号：X171. 5 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2004）01-0031-032,6-二硝基甲苯（2,6-DNT）和4-硝基甲苯（4-NT）在我国第二松花江各江段检出率较高，它们属于美国环保局（EPA）和中国优先控制的有机污染物[1]；4-NT同时也是世界野生动物基金会（WWF）提出的环境荷尔蒙物质之一[2]。徐镜波等[3]曾研究过2,6-DNT对鲤鱼的急性毒性，但目前，关于这两种化合物对鱼类联合毒性的研究在国内外尚未见报道。本文采用经济合作与发展组织（OECD）、国际标准化组织（ISO）推荐使用的试验生物——虹鳉鱼（Poecilia reticulata），对这两种硝基芳烃的联合毒性进行研究，为水质、排污标准的制定及生态风险评价提供更加可靠的依据。 1 材料与方法 1.1 化学试剂 2,6-二硝基甲苯（C7H6N2O4，质量分数98%，Aldrich Chem. Co.）和4-硝基甲苯（C7H7NO2，C. P.，北京化工厂）为受试物，丙酮（分析纯，北京化工厂）作为助溶剂。在试液中，丙酮的体积分数≤1 ml/L。 1.2 试验材料 虹鳉鱼（Poecilia reticulata）亲鱼购自长春市虹鳉鱼专门店，实验室条件下驯养产仔，选1周龄的健康幼鱼作为试验用鱼。幼鱼体长（0.81±0.07）cm。幼鱼成长期间死亡率1%。 表1 2,6-DNT和4-NT对虹鳉鱼的急性毒性 化合物 96 h LC50/(mg·L-1) 毒性分级 2,6-DNT 25.22±0.190 高毒 4-NT 60.26±0.089 高毒 1.3 急性毒性试验 试验采用静水换液法，周期为96 h。急性毒性试验按文献[4]所述方法进行。应用直线内插法求得96 h的半数致死质量浓度（LC50值）。按国家环保局1986年制定的《生物监测技术规范（水环境部分）》[5]的相关规定进行化合物毒性分级。 1.4 亚急性毒性 根据急性毒性试验结果，分别设置包括空白对照在内的4个质量浓度组，各设平行。每个质量浓度组投入15尾鱼。以试验幼鱼的体长、体质量变化为观察指标，每10天称量1次，共进行40天。试验方法见参考文献[4]。 1.5 联合毒性试验 根据单一化合物96 h LC50值，按毒性1∶1设置6~8个试验质量浓度；试验方法及LC50值计算方法与急性毒性试验相同。 1.6 联合毒性评价方法：Marking相加指数法 Marking相加指数法是目前水生毒理学研究中较为常用的一种方法。在求得联合毒性的LC50值以后，应用（1）式求S值： S=mA/nA+mB/nB （1） （1）式中S为水生生物毒性相加之和，A、B分别为受试毒物，m、n分别为单一毒性LC50值及混合毒物LC50值。若S≤1时，相加指数AI=1/S-1；S1时, AI=S(-1)+1。当AI0时，为协同作用；AI0时，为拮抗作用；AI=0时，为相加作用。 2 结果与讨论 2.1 化合物的急性毒性 由表1得出：（1）2,6-DNT和4-NT均属高毒化合物；（2）毒性顺序2,6-DNT4-NT，即二硝基甲苯的毒性大于一硝基甲苯，这与Deneer[6]在1987年报道的结果一致。本结果证明了，对于硝基甲苯类化合物来说，硝基的引入会使化合物毒性增强[7]的结论。 2.2 化合物的亚急性毒性 试验期间，2,6-DNT的2.2 mg/L质量浓度组第33天死亡一尾，其他各质量浓度组均未出现死鱼现象。表2、表3的结果表明，（1）对照组在第20天到30天之间生长最迅速，体质量由21.71 mg增加到40.90 mg，体长由11.13 mm增长到14.05 mm。也正是在这段时间，化合物对虹鳉幼鱼的影响最大：在第30天，2,6-DNT的3种质量浓度的体质量均较第20天有所下降，与对照组均存在极显著差异；1.5