iPS细胞在人类疾病研究工作中的作用.pdfVIP

(二) iPS细胞在人类疾病研究工作中的作用 借助iPS细胞技术人们可以制备出各种各样用途广泛的具有患者特异性的或者疾病病种特异 性的人体细胞。虽然现在还存在一些技术难点，但是该研究领域的进展一定会在我们攻克各种 人类顽疾的征途上给予极大的帮助。 长久以来，能够获得大量与患者个人遗传背景相匹配的细胞一直都是再生医学领域的一大 梦想。因为取自患者本人的细胞系一点也不会影响治疗，而且还有可能为该病种构建体外模型 提供基础研究所需的材料。在培养皿中培养这些携带疾病基因型的细胞，重建整个病理过程并 用这些细胞构建体外疾病模型，这一整套研究方法能帮助我们了解疾病背后的分子机制，还能 为药物研发提供很好的研究及筛选材料。 1. iPS细胞技术的出现彻底改变了人类疾病的建模工作 多年来，体细胞核转移 （SCNT ）技术一直都被认为是制备患者个人特异性细胞系的不二 选择，因为我们曾经借助SCNT技术成功获得了克隆动物多莉羊。不过在多莉羊出生后的第15 年，在利用SCNT技术成功获得小鼠胚胎干细胞后第10年的今天，我们还是无法利用SCNT技术 获得人体胚胎干细胞 （hESC ）。而且要获得人体卵细胞还将面临伦理道德问题和实际工作的困 难，这也是阻碍人体SCNT研究发展的一大障碍。要获得hESC还有一个更加实际的办法，那就 是用植入前遗传诊断技术 （文后小词典）筛选出携带疾病遗传表型的胚胎，然后再从这些胚胎 中筛选出hESC 。我们已经利用这种PGD-hESC技术获得了一些具有遗传疾病特异性的hESC， 不过我们几乎没能利用这些细胞成功构建出疾病模型。制备PGD-hESC细胞需要在人体胚胎早 期就进行筛选，现在这种细胞只能用于可被PGD技术筛选出来的疾病研究工作当中，因此我们 还需要更为专业的筛选技术和hESC制备技术。 诱导多潜能干细胞 （iPS细胞）技术的出现彻底改变了人类疾病的建模工作。日本科学家 Shinya Yamanaka发明的这种iPS细胞技术能让体细胞重编程为多潜能干细胞样细胞，而且制备 方法简单，只需要将几个关键的与细胞多潜能状态有关的转录因子转入体细胞并使其过表达就 可以了。自从报道了第一例来源于小鼠的iPS细胞以来，这个研究领域就一直以极其迅猛的速度 发展，并解决了很多有关iPS细胞多潜能状态的问题。 研究发现，小鼠iPS细胞能够以形成嵌合体后代的方式形成生殖细胞，而且能够在四倍体 胚胎互补实验中发育成为完全由iPS细胞发育而来的完整子代小鼠。有关人体iPS细胞的研究也 获得了飞速的发展，很多问题都很快得到了解决。几年前还很难获得的患者特异性和疾病特异 性细胞到现在已经不再是什么难事了，在很多实验室这甚至已经成为了常规操作项目。 2. 构建疾病模型：我们该站在何处？ 虽然iPS技术还有很多地方需要完善，但它已经在构建疾病模型方面显露出明显的优势。 1111 生命奥秘 不过，目前最需要优先解决的问题是如何避免外源性转入基因插入宿主细胞基因组 （图1）。在 iPS细胞构建疾病模型方面开展得最早的一项研究只是简单证明了使用iPS技术能够获得疾病特 异性的iPS细胞，同时也构建了一些病种特异性的iPS细胞。获得了这些具有疾病特异性的iPS细 胞之后，接下来的工作就是将这些细胞分化成在发病过程中相应的受累细胞系。比如源自缓慢 进展型肌萎缩性脊髓侧索硬化 （amyotrophic lateral sclerosis, ALS ）患者的iPS细胞分化出的脊 髓运动神经元细胞和源自七名散发帕金森综合症 （sporadic Parkinson’s disease ）患者的iPS 细胞分化出的多巴胺能神经元细胞等等。 这些早期的研究工作既没有尝试对细胞开展任何与疾病表型相关的鉴定工作，也没有发现 任何与疾病有关的表型。不过，最近开展的一些研究已经开始从事这方面的工作了，他们希望 利用这些细胞在体外构建疾病模型来研究发病机理，同时也可以利用这些模型进行药物筛选。 图1 iPS细胞在人类疾病研究工作中的用途。