IL．1B基因多态性与糖尿病及牙周病的相关性研究.pdfVIP

·基础研究· IL．1 B基因多态性与糖尿病 及牙周病的相关性研究 李波。高秀秋+ (辽宁医学院附属第二医院，辽宁医学院口腔医院，辽宁锦州121000) 摘要：目的探讨IL．1B基因多态性在糖尿病及牙周病发病中的作用。方法将60只雄性sD大鼠随机分为 4组各15只，N组及P组予普通饲料，DM组及DP组予高糖、高脂饲料并尾静脉注射链脲佐菌素建立2型糖尿病 模型；P组及DP组采用正畸丝结扎建立牙周病模型。记录各组一般情况；8周后处死大鼠，观察牙周组织学改变， bp和102bp两个片段，各组均表现一种基因型TaqI 于TaqI限制性内切酶识别位点，其PCR产物酶切后出现163 I／I。结论本研究成功制备出2型糖尿病伴牙周病大鼠模型，IL-1B基因多态性与2型糖尿病及牙周病无明显相 关性。 关键词：白细胞介素一1B；基因多态性；糖尿病；牙周病；SD大鼠 中图分类号：R587．1；R781．4文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2010)11-0046-02 糖尿病和牙周病均为严重危害人类健康的疾 针分离右侧上颌第2磨牙牙龈，采用o．2mm正畸 病，两者相互影响、互为因果，近年来遗传因素在其 结扎丝结扎，颊侧打结，每7d监测一次结扎情况， 发病中的作用引起广泛关注。细胞因子IL．1基因 脱落者重新结扎；DM组及DP组喂养4周后禁食不 禁水12h，一次性尾静脉注射STZ(30 多态性与慢性牙周炎的易感性明显相关…，而与2 mg／kg体质 型糖尿病伴牙周炎的相关性研究尚鲜见报道。2009量)HJ，72h后测空腹血糖16．7mmol／L为2型糖 年3～6月，我们建立了2型糖尿病伴牙周炎大鼠模 尿病建模成功H】。8周后处死各组大鼠。 型，并对其IL-1B基因多态性进行了测定。现报告1．3相关指标观察①动物一般情况：实验期间观 如下。 察动物生活状态、体质量、饮食、粪便等变化。②牙 1材料与方法 周组织学改变：取右侧上颌第二磨牙及其牙周组织， 用40 1．1材料6周龄健康雄性SD大鼠60只(辽宁医g／L多聚甲醛固定，100g／L的EDTA脱钙，石 学院实验动物研究中心)，体质量200—250g；链脲 蜡包埋，制成颊腭向切片，HE染色，光镜下观察结 佐菌素(sTz)、氢氧化钠、柠檬酸、柠檬酸钠、乙二胺合上皮、沟内上皮、牙龈上皮、上皮下炎症细胞浸润 情况¨J。③IL—l 四乙酸(EDTA)二钠，血液DNA提取试剂盒，无菌 合酶链式反应一限制性片段长度多态(PCR—RFLP) 去离子纯水(自制)，MgCl2、dlVIP、TaqDNA聚合酶， 技术。取各组静脉血1．8IIll，3．8％枸橼酸钠溶液 DL500DNAM“er、TaqI限制性内切酶、PCR引物及 (1：9)抗凝，4℃保存备用，按试剂盒说明书步骤提 琼脂糖；高糖、高脂饲料配方：胆固醇2．5％，胆酸盐 1％，蔗糖20％，猪油10％，普通饲料66．5％瞄1。 1．2动物分组及处理将60只SD大鼠以普通饲 5．0 与人IL—lB基因同源性为76％)。采用Premier 料适应性喂养1周后随机均分为4组各15只，N组 软件设计引物，PCR反应体系：DNA模板l 及P组予普通饲料，DM组及DP组予高糖、高脂饲