耐As2O3的白血病细胞系SHI-1／AS2的建立及耐药机制的初步研究.pdfVIP

苏州大学学报(医学版)2009；29(4) 597 · 基础医学 · 耐As2O3的白血病细胞系 $HI一1／AS2的建立 及耐药机制的初步研究 王 勇，薛永权 ，陈苏宁，吴亚芳，潘金兰，张 俊，沈 娟 (苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所 ，卫生部血栓与止血重点实验室，江苏苏州 215006) 摘要：目的 建立三氧化二砷(As：0，)的耐药细胞株 ，进一步从分子水平研究其耐药机制 。方法 采用高度短时问 接触培养方法建立耐As20，的自血病细胞系(SHI—lA／S2)。细胞倍增时间和耐药倍数测定采用M1Tr法；细胞周期和细 胞免疫表型测定采用流式细胞分析术；常见的 10个耐药基因检测和比较采用实时定量PCR (RQ—PCR)。结果 耐 As2O3的自血病细胞系SHI一1，AS2的细胞倍增时间与 SHI一1相似 ，差异无统计学意义 (PO．05)。SHI-1／AS2细胞 G0／G1 期细胞少于SHI一1细胞 ，而 G#M、S期细胞则多于SHI一1细胞 ，差异均有高度统计学意义(均 P0．01)。SHI—l，AS2细胞 对 As203的耐药倍数是 SHI一1的2．7倍 ，差异有统计学意义 (PO．O1)。SHI一1／AS2细胞 的集落形成率高于SHI—l细胞 。 SHI一1／AS2细胞 的耐药相关基因Bcl一2有 明显上调 ，Bax、Fas及 MGMT下调，而其他耐药相关基因无明显变化。结论 建立一株对 As2O3产生耐药的白血病细胞系 SHI一1，AS2，耐药倍数是 SHI一1的2．7倍 ，其耐药机制与 Bcl一2、Bax和Fas 基因介导 的细胞凋亡调控有关。 关键词 ：抗药性 ；砷剂 ；白血病 中图分类号 ：R733．7 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—0399(2009)04—0597—04 EstablishmentofAs203ResistantCellLine，SHI-1／AS2，andthe M echanism ofItsDrugResistance WANGYong,XUEYong-quan,CHENSu—ning, Ya-fang,PANJin—lna，ZHANGJu SHENJuna (JiangsuInstituteofHematology，theFirstHospitalAffiliatedtoSoochowUniversity，Thrombosisand HemostasisKeyLaboftheMinistryofHealth，SoochowUniversity，JiangsuSuzhou，215006，China) Abstract：Objective ToestablishtheAs2O3resistantcelllineSHI一1／AS2，andtoinvestigatethe mechanism ofSHI一1／AS2’SresistancetoAs203．M ethods TheresistanceofSHI一1toAs203gradually wasinducedbyshort—timeCO—culturingSHI一1withAs203．Thecelldoublingtimeandtheresistantcapa— bilitytoAs2O3ofSHI一1andSHI一1／AS2wereevaluatedbythizolylbluemethod(MMT)．Theimmunopro— fileandthecellcycledistributionofthemwerestudiedbyflowcytometry (FCM)．Thetendrugresis- tance—relatedgenesweretestedbyRQ—PCR．Results Therewasnosignificantdifferencebetweenthe celldoublingtimeofSHI一1andSHI—l／AS2(0．05)．TocomparewithSHI一1，theport