金—199通过巯基苹果酸标记丙种球蛋白的化学研究.pdfVIP

维普资讯 一 北京大学学报 (自然科学版j，第躺卷，第 2瑚，1990年 Act Scientiarum NaturaIium UnlversitatisPekinensls． VoJ．26， 弛 2 (J90J 金-199通过巯基苹果酸标记 丙种球蛋 白的化学研究 刘昭清 吴永慧 刘元方 (技 术枷理 学系) 摘 要 Au标记的抗肿瘤单克隆抗体．适用于肿瘤的诊断和治疗 车工作采用人丙种球蛋 白(IgG)作为单抗的模型蛋白质，琉基苹果酸(TMA)为连接 IgG与 Au的双 功 能 连接 剂。系统地研究了 S一乙酰巯基琥珀酸酐(AMSA)的制备、AMSA 与 IgG 的偶连、水解 出巯基，以及 IgG TMA 偶连体与 Au的化学反应条件和影响因素。用此法所得标记化 台物 Au—TMA一gG 在空气中不够稳定，在俸内的稳定性有待进一步考 查 所 得结果 可推广用于标记单克隆抗体。 关键词 盘 [99；双功能连接 荆；巯基苹果酸 免疫球蛋 白G(IgG) 1．前 言 放射性核素标记单克隆抗体广泛用于放免诊断和放免治疗 。现在 已能用 …In、 I、 Ga、”Ca、 。Pd、”Ro、 {“At、”Bi等一系列核素标记单克隆抗体。标记的方法可以采用 直接标记方法或双功能连接剂(BCA)涵 EE,TA、DTPA，TTHA、去铁 草 胺 (DF)、金属碗 基蛋 白(MT)，大环胺、酚胺基羧酸等螯 台剂都被用作 BCA，通过它将抗体蛋 白质与同BCA 形成动力学惰性或热力学稳定性结合物的金属元素相连接 ”Au具有158．4keV，208keV 的 射线，适宜干 像机显像，低能卢粒 子 可用于杀伤 癌细胞，半衰期为3．14天，正适用于标记单克隆抗体进行放免诊断和治疗。”Au可 用反应 一 堆生产，经 ”Pt(n， )…Pt— …Au核反应 ，用离子交换法分离得到无载体的…Au 。 Au(Ⅲ)是强氧化剂，能氧化蛋 白质 中胱氨酸，半胱氨酸和蛋氨酸残基，与过量巯基反应时， 形成 Au(I)络台物 。Anderson等用三价的 ”。AuC17直接标记了单抗 CEA多克隆抗体 ， 但他们得到标记抗体不稳定，而且Au(Ⅲ)的氧化性可能使被标记的抗体失活。 为制备稳定的 ”。Au标记单克隆抗体，本工作研究了用巯基苹果酸作为双功能连接剂， 把 它偶连到 IgG i 在 IgG上引入巯基，再与 Au(I)络合，形 成 ”’Au—TMA—lgG 的方 本文1988年n月7目收到 维普资讯 北 京 大 学 学 报 第26卷 法 所得标记物在空气中不够稳定，在氮气保护下可提高稳定性，在俸内的情况有待进一步 研究。 2．实 验 部 分 2．1． 实验材料 实验采用 IgG，即丙种球蛋白 (卫生部k海生物制品研究所)作为单克隆抗体的模型蛋 白质。 按 Holmberg的方法 ，用硫代乙酸与丁烯二酸酐加成反 应制备 S一乙酰巯基琥珀酸 酐(AMSA)，在苯中重结晶，得到产品熔点及元素分析数据与理论值一 致。 0 0 lj c}；．0H