蓝圆鲹骨骼肌GPI的纯化及其对肌原纤维降解的抑制.pdfVIP

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第 17卷 第6期 集关大学学报 (自然科学版) Vo1.17 No.6 2012年 11月 JournalofJimeiUniversity(NaturalScience) NOV.2012 [文章编号]1007—7405(2012)06—0414—07 蓝圆 骨骼肌 GPI的纯化及其对肌原纤维降解的抑制 张超群 ,钟 婵 ,王 诚 ,苏文金 ,曹敏杰 2 (1.集美大学生物工程学院,福建 厦门361021;2.福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建厦门361021) [摘要]通过硫酸铵分级沉淀、Q.Sepharose阴离子交换层析和 SP-CSphf1.ro~阳离子交换层析等方法, 从蓝圆鲣骨骼肌中分离纯化得到葡萄糖 一6一磷酸异构酶 (GPI).SDSP·AGE结果显示,GP1分子质量约为 56ku;Western-blot分析显示,纯化的蛋白质与抗白姑鱼GPI多克隆抗体有很强的阳性反应,表明其为 GPI;GPI的最适pH值和最适温度分别为8.0和40℃;GPI能有效抑制蓝圆碜肌原纤维蛋白在55 下的 自身降解,且随着GPI添加浓度的增加,肌原纤维蛋 白的降解逐渐受到抑制,提示 GPI可用于鱼糜制品生 产以提高产品的凝胶强度. 【关键词]葡萄糖一6一磷酸异构酶;蓝圆碜;纯化;降解;抑制;肌原纤维 [中图分类号]Q558 [文献标志码]A PurificationofGlucose-6-phosphateIsomeraseandItsInhibitiononthe DegradationofMyofibrillarProteinsfrom BlueScadSkeletalMuscle ZHANGChao.qun ,ZHONGChan ,WANGCheng ,SUWen-jin ,CA0Min-jie, (1.CoHegeofBiologicalEn西neering,JimeiUniversiyt,Xiamen361021,China;2.KeyLaboratoryofScienceand TechnologyforAquaculturenadFoodS~eyt (JimeiUniversiyt),Fujina Province,Xiamen361021,China) Abstract:Glucose-6一phosphateisomerase(GPI)from thebluescadskeletalmusclewaspurifiedto homogeneitybyammoniumsulfatefractionation,columnchromatographiesofQ—SepharoseandSP—Sepharose. PurifiedGPIrevealedasinglebandonSDS.PAGEwithmolecularweightof56ku.Western—blotnaalysisre- vealedhtathtepurifiedproteinfrom bluescadreactedpositivelywithhtepolyclonalnatibodyagainstGPIfrom whitecroaker,suggestinghtisproteinwasGPI.Theoptimum pH andtemperatureofbluescadGP1were8.0 and40oC,respectively.At55oC,wiht hteincreasingadditionofGPI,htedegradationofmyofibrillra pro— teinswaseffectivelyinhibited,suggestingGPIcouldbeappliedforsurimiproductioninordertoimprovehte elasticityofhteproduct. Keywords:glucose-6一phosphateisomerase;bluescad;purification;dergadation;inhibition;myofi— brillra proteins O 引言 海水鱼蓝圆 (Decapterusmaruadsi)为鲈形 目够科圆够属的一种,俗名鳗、

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