检测鸡黄病毒血清抗体间接ELISA方法的建立与应用.pdfVIP

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2017-09-13 发布于重庆
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检测鸡黄病毒血清抗体间接ELISA方法的建立与应用.pdf

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中国动物传染病学报 2012，20(6)：23—28 ChineseJournalofAnimalInfectiousDiseases · 研究论文 · 检测鸡黄病毒血清抗体间接ELISA方法的建立与应用施少华，傅光华L，程龙飞，王建，陈红梅，万春和L，胡思科。，宋秀梅，黄瑜 (1．福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州350013；2．福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福州 350013；3．天津市中升挑战生物工程有限公司，天津 300380) 摘要：本研究以鸡黄病毒FQ—C1株为包被抗原，建立检测鸡黄病毒血清抗体的间接 ELISA方法。经优化后确定其最佳工作条件为每孔包被抗原0．57 g，血清以1：640倍稀释，羊抗鸡IgG酶标抗体以1：3200稀释，显色10min后读取OD450值，PN／值 2．1的血清为阳性。本实验所建立的诊断方法敏感性高于血清中和试验。对849份来自福建的血清样品进行检测表明，鸡黄病毒的血清阳性率达33．1％，说明鸡黄病毒感染有一定的流行性。关键词：鸡黄病毒；间接 ELISA；血清抗体中图分类号：$852．659．6 文献标识码：A 文章编号：1674．6422(2012)06．0023．06 DEVELoPM ENT oFAN INDIRECTELISA FoRDETECTIoN oFSERUM ANTIBoDYTo CHICKEN FLAVIVIRUS SHIShao—hua，，FU Guang．hua，，CHENG Long．fei，，WANGJian，CHENHong—mei，， WAN Chun—he ，HU Si．ke。SONGXiu．mei，HUANGYu’ ， (1．InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryMedicine，FianAcademyofAgriculturalSciences，Fuzhou350013．China,2．Fujian AnimalDiseasesControlTechnologyDevelopmentCenter,Fuzhou350013,China；3．T 吩inZhongshengTiaozhanBiologicalEngineering Inc．，~awin300380,China) Abstract：Anindirectenzyme．1inkedimmuosorbentassayfELISA1wasdevelopedtodetectserum antibodiestochickenflavivirus．The ELISAplateswerecoatedwithchickenflavivirusFQ—C1strain．Theworkingparameterswereoptimizedtobe0．57ggcoatingantigen in100gLperwell，testserum dilutionat1：640nadHRP—labeledgoatanti—chickenIgG at1：3200．After10minutesofcolordevelopment withtetramethylbenzidine(TMB)substrate，athresholdofpositiven／egativesignalratio(PN／) 2．1wasdeterminedasapositivesample． TheELISA methodwasshowntobemoresensitivethanseurm neutralization．A totalof849chickenserum samplescollectedfrom FujianprovinceweretestedinindirectELISAand284samples(33．1％)werepositive，in