Allo-PBSCT患者CD4＋CD25＋调节性T细胞的体外研究.pdfVIP

山东医药2011年第 51卷第 33期 Allo—PBSCT患者 CD4+CD25+调节 T细胞的体外研究 翟海龙 。赖永榕 (1黄石理工学院医学院，湖北黄石435003；2广西医科大学第一附属医院) 摘要：目的 探讨异基因外周血干细胞移植 (Allo—PBSCT)患者外周血CD4CD25调节性 T细胞 (Tregs)在协 同刺激信号作用下的增殖反应、与CD4CD25一T细胞混合淋巴细胞反应及上述两种培养细胞的细胞因子分泌情 况。方法 对 36例 Allo—PBSCT患者离体 CD4 CD25Tregs在抗 CD3．mAbs和抗 CD28一mAbs的刺激下行 CD4 CD25Tregs培养和CIM CD25Tregs、CD4 CD25一T细胞混合淋巴细胞培养72h，然后加入 CCK一8溶液孵育 1h， 用酶标仪检测OD 。值 ，同时测量上述两种细胞培养上清液中IL一10、TGF—B和IFN一^y的浓度。另以7例健康者为对 照组。结果 CD4 CD25 Tregs细胞 OD450值低于 CD4 CD25一T细胞 (P0．O1)。CD4 CD25 Tregs与 CD4 CD25一T细胞混合OD。值也低于CD4CD25一T细胞(P0．01)。有移植物抗宿主病 (GVHD)和无 GVHD患者离 体CIM CD25Tregs在抗CD3-mAbs和抗CD28．mAbs的共刺激下分泌的IL．10、TGF—p和 IFN一低于CIM CD25一T 细胞 (P0．01)，有GVHD和无 GVHD患者的两细胞混合组分泌的这3种细胞因子均低于CD4 CD25一T细胞 (P 0．05)，Allo—PBSCT患者分泌细胞 因子情况与对照组类似。结论 有效地利用 Allo—PBSCT受者外周血 CD4 CD25Tregs的抑制功能，则有可能降低Allo—PBSCT后GVHD的发病率。 关键词：干细胞移植 ，异基因；移植物抗宿主病；CD4 CD25调节性T细胞；增殖，体外 中图分类号：R733．7 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2011)33-0010-03 Studyonpost-allogeneicperipheralbloodstem celltranspIantatiOnpatients’ CD4 CD25 regulatoryTcellsinvitro ZHAIHai．1ong ， ， 一rong (1MedicalCollegeofHuangshiInstituteofTechnology，Huangshi435003，P．R．China) Abstract：Objective ToinvestigatetheproliferationreactionofCD4 CD25 Tregsinthestimulatingofcostimulato— rysignal，lymphocytereactionsmixedwithCD4 CD25一TcellsofCD4 CD25 Tregs，andcytokinesecretionstateofthe twocellsinallogeneieperipheralbloodstemcelltransplantation(Allo—PBSCT)patients．Methods CD4 CD25 Tregs andCD4 CD25一T cellsfrom peripheralbloodobtainedrfom 36patientswhohadundergoneAllogeneicperipheralblood stemcelltransplantation(Allo—PBSCT)，7healthyvolunteersascontrol，wereisolatedwithmagneticcellssortingsepara— tion．ThenCD4 CD25 TregsandCD4 CD25 Tregs+CD4 CD25一Tcellswerecuheredfor72hours．stimulatedbyan— ti．CD3一mAbsandanti—CD28一mAbs．AfterthatthecuhuresaddedwithCCK．8 solutionwereincubatedofrlhour．Then OD450weredetectedbyELISA．IL-10，TGF—BandIFN一rfomthetwoabovecell