多重PCR的建立及黄淮麦区主要品种品质相关基因的鉴定.pdfVIP

中国农业科学 2008,41(3):643-653 Scientia Agricultura Sinica 多重PCR的建立及黄淮麦区主要品种品质相关基因的鉴定 1 2 3 1 3，4 万映秀 ，张晓科 ，夏先春 ，张平治 ，何中虎 1 2 3 （安徽省农业科学院作物研究所/安徽省农作物品质改良重点实验室，合肥 230031 ； 西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100 ； 中国农业科 4 学院作物科学研究所/ 国家小麦改良中心/ 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程，北京 100081 ； CIMMYT 中国办事处，北京 100081 ） 摘要：【目的】小麦加工品质由多个位点控制，而每个位点又有多个等位基因控制。建立品质性状多重 PCR 反应体系是提高分子标记辅助选择效率及降低成本的一种重要措施。【方法】选择影响小麦品质性状重要基因的分 子标记，即高分子量谷蛋白亚基基因标记Ax2*、Bx14、Bx17和Dx5；低分子量谷蛋白亚基基因标记Glu-A3 d；糯 蛋白亚基Wx-B1基因标记BDFL-BRD和Wx-D1 基因标记MAG269；1BL/1RS易位标记ω-sec及多酚氧化酶（PPO）活 性基因标记 PPO18。根据优质面包、优质面条亚基组成要求及引物的退火温度，建立 3 个多重 PCR 反应体系 PCR- Ⅰ（Ax2*/Bx17/Dx5）、PCR-Ⅱ（BDFL-BRD/MAG269/PPO18）和PCR-Ⅲ（Bx14/Glu-A3d/ω-sec）。【结果】用构建 的3个多重PCR对141份黄淮麦区小麦品种加工品质相关基因的分布情况进行了检测。结果表明Ax2*、Bx14、Bx17 具有较低的分布频率，分别为 4.3%、7.1%、1.4%；Dx5 和 Glu-A3 d 分布频率相对较高，分别为 17.7%和 27.7%； 而 1BL/1RS 易位和低 PPO 活性（扩增片段为 876 bp）的材料分别占 44.0%和 51.8%；Wx-B1 缺失材料占 4.3%。在 供试的 141 份材料中已有 80 份进行了高、低分子量谷蛋白亚基和黑麦碱的 SDS电泳检测，与本研究建立的 多重PCR检测结果完全一致。【结论】建立的多重PCR体系可以准确、稳定、高效地检测9个小麦品质性状的基因 组成。 关键词：普通小麦；加工品质；多重PCR Development of Multiplex PCR and Identification of Major Quality Genes in Cultivars from Yellow and Huai River Valley Wheat Region 1 2 3 1 3,4 WAN Ying-xiu , ZHANG Xiao-ke , XIA Xian-chun , ZHANG Ping-zhi , HE Zhong-hu 1 ( Crop Research Institute, Anhui Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Quality Improvement, Anhui Province, Hefei 230031 ; 2College of Agronomy, Northwest Sci-Te