大鼠睾丸支持细胞体外培养及FSH对其增殖的影响.pdfVIP

维普资讯 第 31卷第 3期 河 北 农 业 大 学 学 报 VO1．31NO．3 2008年 5月 JOURNALOFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI May．2008 文章编号 ：1000—1573(2008)03—0073—04 大鼠睾丸支持细胞体外培养及 FSH对其增殖的影响 李玉荣 ， 白 瑜 ， 尹晓敏 ， 周向梅 ， 韩利方 ， 赵德 明 (1．国家动物传染海绵状脑病实验室，中国农业大学 动物医学院，北京 100094 2．河北农业大学 动物科技学院，河北 保定 071000) 摘要 ：为探索睾丸支持细胞体外纯化培养 的方法 ，并观察不 同水平 FSH对支持细胞增殖能力的影响，本研究采 用胶原酶 I和胰蛋白酶序贯两步消化法和低渗处理法分离、纯化睾丸支持细胞 ，Fas—L免疫荧光法对纯化后 的 支持细胞进行鉴定。取培养第 2代第 2天 已完全贴壁的支持细胞 ，在其培养液 中添加不同浓度 FSH，培养 16h 后 ，MTT法检测 FSH对支持细胞增殖能力的影响。结果表明，该方法培养的支持细胞纯度高，且 FSH的添加可 显著促进支持细胞 的增殖 (P0．01)，为支持细胞高效制备提供可行性。 关 键 词 ：大 鼠；睾丸 ；支持细胞 ；培养 ；卵泡刺激素 (FSH)；增殖 中图分类号 ：Q 8131 文献标识码 ：A Cultivation ofratsertolicellinvitro andeffectof FSH on itsproliferation LIYu—rong’，BAIYu ，YIN Xiao—rain ，ZHOU Xiang—mei，HAN Li—fang ，ZHAO De—ming (1．NationalAnimalTransmissibleSpongiform EncephalopathiesLaboratory，CollegeofVeterinaryMedicine，。 ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100094，China； 2．DepartmentofAnimalScienceandTechnology，AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071001，China) Abstract：Ratsertolicellswereisolatedandcultured in vitro。andeffectsofFSH on theprolifera— tionoftheculturedsertolicellswereinvestigated．Tripsinandcollagenasewereusedforharvesting andprocessingofthesertolicell，andthen thepurityofsertolicellswasidentifiedbytheimmun— ofluorescenceofFas—L．Followingcultureoftheabove—preparedcellsfor2days．sertolicellswere incubatedwiththepresenceofthedifferentconcentrationofFSH。aftercultureofr16h 。theprolif— erationofsertolicellswasdeterminedbyMTT assay．Resultsshow theculturemethodiseffective forsertolicellsofh