桃离体培养与植株再生的优化研究.pdfVIP

北方 园艺2011(03)：163～165 ·生物技术 · 桃离体培养与植株再生的优化研究 尚 霄 丽 ，汪 妮 ，李 明 泽。，张 建 鹏。，李 靖 (1．河南农业大学 ，河南 郑州 450002；2．濮阳职业技术学院 ，河南 濮 阳457000；3．河南心连心化肥有限公司 ，河南 新乡 453731) 摘 要：以桃杂种单株 2‘—7’带腋 芽茎段为试材，对桃离体培养进行优化。结果表明：MS十 1．5mg／L6-BA-+-0．3rag／IIBA培养基 中腋芽诱导率最高达 88．89 ；MS+1．5mg／I6BA+ 0．5rag／LIBA培养基增殖系数最高 2．37；试管 内培养 出的健壮新梢，接种 于 0．5mg／LIBA 的 1／2MS培养基中10d后转入无生长调节剂的1／2MS培养基中光 ／暗(12h／12h)周期下生根效 果较好 ，生根 率达 90．6 。 关键词：桃 ；离体培养；植株再生 中图分类号：S662．103．6 文献标识码 ：A 文章编号：i001--0009(2011)03--0163--03 ~ (PrunuspesrieaL)属于蔷薇科 (Rosaceae)李属植 MS为基本培养基附加不同植物生长调节剂的增殖培养 物 。我国是桃的原产地和主产 国，不仅种质资源丰富， 基中，30d后调查其生长及增殖情况。培养条件：温度 而且产量位居世界各国之首，占世界总产量 2O 以上。 为 25℃，光照时间为 12h。 随着 国民经济的发展和人民生活水平的不断提高，人们 1．2．2 生根培养处理 将新梢接种于不同生长调节剂 对桃的需求量愈来愈大，但 由于桃不耐贮藏、病害严重 的生根培养基 中，筛选适宜的生根培养基；全光照或暗 等因素制约了桃生产的发展。因此 ，培育耐贮藏、抗病 培养 5、10d，7d后转入无生长素的培养基中，30d调查 能力强的桃新品种已成为迫在眉睫的任务，但传统的杂 生根率、根条数，确定适宜的暗培养时间；以 1／2MS大为 交育种周期长且效率低，基因工程技术为桃育种开辟 了 基本培养基附加 0．5、2．0mg／IIBA为生根培养基 。设 新的育种途径 。现以桃杂种单株 2‘—7’茎段为外植体，优 计 4种不同的处理方法研究不同处理对生根的影响，方 化了适宜桃茎段培养的启动、增殖、生根培养基 ，针对桃 法分别为：A直接接种到无生长素的培养基中；B在有生 生根困难筛选出了高效的生根方式，建立了桃离体快繁 长素的培养基中 5d后转移到无生长素的培养基 中；C 体系，为桃遗传转化提供材料。 在有生长素的培养基中10d后转移到无生长素的培养 l 材料与方法 基 中；D一直在有生长素的培养基中。 1．1 试验材料 2 结果与分析 试验选用中国农业科学院郑州果树研究所桃资源 2．1 不同6一BA、IBA浓度组合桃杂种单株 2‘—7’的有效 圃杂种植株 2‘—7’，4～6月取 5cm左右的正常新梢。 萌芽率 1．2 试验方法 茎段接种在启动培养基上 ，10d左右时茎段基部逐 1．2．1 外植体处理和启动培养 将新梢去掉叶片，用洗 渐膨大；15d后腋芽开始萌发 ，露出淡绿色的小芽；3Od 衣粉冲洗后进行表面消毒，70 的酒精溶液浸泡 3OS， 后芽伸长到 3～4cm，叶片展开。启动培养过程 中，植物 0．1 HgC15min，无菌水 冲洗 5次，然后剪成 0．5～ 生长调节剂配比对腋芽的萌发有显著影响(表 1)。表 1 lcm的单芽茎段，接种于以MS为基本培养基 ，附加不同 的极差分析结果表 明，6-BA浓度变化较 IBA对启动培 浓度的6-BA、IBA的