小肽在原核和真核细胞中抑制α-synuclein异常折叠的研究.pdfVIP

小肽在原核和真核细胞中抑制α-synuclein异常折叠的研究.pdf

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2011年21(3) 生 物 技 术 MAX进入细胞效率约为2.7±1.41%。而没有PTD穿膜肽的 参考文献: ., MAX 蛋白是不会进入正常的细胞中,即穿膜效率应该为0。与 [1]TakahashiK,YamanakaS.Inductionofpluripotentstemcellsfrom 实际不相符,推测是因为FITC与CHO细胞孵育完后,洗涤游 mouseembryonicandadultfibmbl~tculturesbydefined~ctom[J】.Cell, 离FITC时不彻底 ,或者有破损的细胞 ,导致少量MAX 进入破 2006,126(4):663—676. [2]RobertBlelloch,MomcaVenere,JonathnaYen,eta1.Generationof 损的细胞内,检测到有少量的荧光信号。 inducedpluripotentstemcellsintheabsenceofdrugeslection[J].Cell 荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer, Stem Cell,2007,1(3):245—247. FRET)作为一种高效的光学 “分子尺”,在生物大分子相互作 [3]OkitaK,lchisakaT,YamnaakaS.Generationofgennlinecompetent 用、免疫分析、核酸检测等方面有广泛的应用。在分子生物学 inducedpluripotentstemcells[J].Nature,2007,448(7151):313— 领域,该技术可用于研究蛋白质 一蛋 白质、核酸与核酸、核酸 317. 与蛋白质之间的相互作用。Cremazy等分别用荧光染料 Sytox [4]WernigM,MeissnerA,ForemanR,eta1.Invitroreprogrammingof Orange和绿色荧光蛋白GFP进行标记,并运用FRET—FLM技 fibroblastsintoapluripotentES—cell—likestate[J].Nature,2007,448 术在原位检测到DNA和组蛋白I-I2B相互作用¨们。然而运用 (7151):31g一324. FRET法体外检测核转录因子与特异核酸序列结合活性的方 [5]OhatS,ImaizumiY,OkadaY,eta1.Generationofhumanmelanceytes 法却未见报道。我们首次用FRET对重组PTD—Sox2结合特 frominducedpluripotentstemcells[J]. One,201lJna 13,6(1): el6182. 异 DNA序列的活性进行检测,这套系统适用于任何转录因子 与其特异DNA结合序列作用的检测,具有广泛应用的价值。 [6]HarleyVR,Lovell—BadgeR,GoodfellowPN.Definitionofacon- sensusDNAbindingsiteforSRY[J].NudAcidsRes,199

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