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· 48o4 · 现代生物医学进展 www~shengwuyixue．com ProgressinModernBiome~emeVoL11No．24 DEC9011
幽门螺杆菌感染诱导microRNA一146a表达的机制研究
刘 真 贾赤宇 胡永亮 毛旭虎 邹全明 △
(1解放军309医院整形美容烧伤修复中心 北京 100091；2第三军医大学临床微生物及免疫学教研室 重庆400038)
摘要 目的：探讨幽门螺杆菌(H．pylori)感染引起人 胃上皮细胞microRNA一146a(miR一146a)上调的分子机制。方法：分别用H．pylori
重组蛋白、全茵蛋白、培养上清、感染相关炎性因子(IL一8、TNF．a、IL．1B)以及 TLR配体刺激人胃上皮细胞 ，检测细胞miR．146a
的表达；通过生物信息学软件预测和荧光素酶实验鉴定miR-146a启动子，分析诱导表达的相关信号通路。结果 ：除H．pylori感染
相关炎性因子 IL一8、TNF—a、IL一131 能够明显诱导miR-146a表达上调(P0．01)9~，其他刺激因素均不能诱导miR-146a的显著表
达；3-采用RNAi技术将 IL_8、TNF—a、IL．131分别沉默，检测H．pylori诱导miR一146a表达时，各沉默组与对照组均无显著差异。
软件预测显示miR-146a启动子序列中含有多个NF．KB结合位点；H．pylori能够显著增加miR．146a启动子荧光素酶报告载体
的相对荧光素酶值；当启动子序列中的NF—KB结合位点发生突变，其相对荧光素酶比值显著降低 (P0．05)。结论 ：H．pylori感染
相关炎性因子 IL一8、TNF—a、IL一1B 能够诱导miR一146a表达明显上调 ；NF—KB信号通路在H．pylori感染诱导miR-146a的表达
中发挥关键作用。
关键词 ：microRNAs；幽门螺杆菌；胃上皮细胞 ；炎性因子
中图分类号：Q75，Q78，R378．2 文献标识码 ：A 文章编号：1673—6273(2011)24—4804—04
TheMechanism ofM icroRNA一146aExpressionin
HelicobacterpyloriInfection*
L1UZhen~,JIAChi-yu1,HUYong-liangJ,MAOXu-ht?,ZOUQuan-min季
(1CenterofPlasticSurgeryandBurnRepair,The309thHospitalofPLA,Beijing100091，China；
2DepartmentofClinicalMicrobiologyandImmunology,ThirdMilitaryMedicalUniversiO,Chongqing400038,China)
ABSTRACTObjective：ToinvestigatethemechanismofmicroRNA·146a(miR-146a)up—regulationinHelicobacterpylori(H．pylori，
HP)infection．Memods：Humangastricepitheliumcells(GES一1cells)werestimulatedrespectivelybyH．pylorirecombinationproteins，
wholeHPprotein，HPsupematant，infection-relatedcytokinesandTLR ligandsandtheexpressionsofmiR一146aofGES一1cellswere
detectedbyRealtimequantitativePCR．ThesignalpahtwaysofmiR一146ainductionwereanalyzedbybioinformaticssoftandluciferase
assay．Results：MiR-146awasinducedbyH．pyloriinfection—relatedcytokineIL一8，TNF—a，IL一131 (P0．01)．GES一1cellstransfectedby
siRNAforIL一8，TNF—a，IL一1B werestimulatedbyH．pyloriandthemi
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