基于光学投影层析的三维显微成像系统.pdfVIP

( ) 　第 23 卷第 4 期　　　　　　佛山科学技术学院学报 自然科学版 　 Vol .23 No .4 　2005 年 12 月　 ( ) .2005 Journal of Foshan University Natural Science Edition Dec 文章编号:(2005) 基于光学投影层析的三维显微成像系统 周红仙, 王　毅 (佛山科学技术学院 光电子与物理学系, 广东 佛山 528000 ) 摘要: 介绍了光学投影层析成像技术的原理及应用, 阐述了自行研究建立的光学投影层析成像系统, 给出了利 用该系统得到的样品的重建图像。 关键词: 光学投影层析; 三维显微成像; 滤波反投影 中图分类号: R 312　　　　文献标识码: A 三维显微成像技术是进行生物发育及基因功能研究必不可少的工具, 通过胚胎的三维成像可以了 解胚胎发育的复杂过程; 通过胚胎中基因表达的三维成像, 可以确定基因的功能及基因间的相互作用, 这是继人类基因组计划后基因领域的另一挑战[1 4] 。目前的三维显微成像技术有连续切片、共聚焦显微、 光学相干层析和显微核磁共振技术[5,6] 。连续切片既复杂又耗时, 需要对胚胎作几百个连续切片, 再进行 [7] 显微成像, 并需要手工校正切片的相对位置 ; 共聚焦显微技术无法进行非荧光成像, 光学相干层析技 术无法进行通常的染色及荧光成像, 另外受成像深度的限制, 共聚焦显微技术和光学相干层析技术无法 对完整的胚胎进行三维成像[8,9] ; 显微核磁共振技术的分辨率较低, 且价格昂贵[10] 。 光学投影层析(Optical Projection Tomography , OPT ) 是一种新的三维显微成像技术, 是显微技术 和CT 技术的结合, 于 2002 年 4 月在 SCIENCE 上被首次报道[11] , OPT 可以对完整胚胎进行高分辨率 的荧光和非荧光三维成像, 并且成本低、速度快, 这是其他三维显微成像技术无法达到的,OPT 有望取 代其他三维显微成像技术, 成为进行生物发育学及基因表达研究的工具。 ( MRC Medical Research Council ) 人类遗传学小组已经实现OPT 显微成像技术, 并进行了小鼠胚胎及基因表达的三维成像, 由 于此技术的廉价及快速, 用于建立小鼠的基因表达数据库[11] 。 本文研究建立的OPT 系统主要包括: 光学成像系统、图像采集及图像重建, 其中光学成像系统由 两个×10 的目镜及光阑组成, 纵向成像范围可达 20 ; 重建算法为滤波反投影算法, 滤波函数为 mm S L 函数, 该系统简单, 适合于一般实验室应用。 1　OPT 的原理 的原理和 - 的原理类似, 首先得到样品的投影数据, 经计算机重建, 得到样品三维结构。 OPT X CT 不同的是: - 是直线投影, 而 是近似直线投影。 的原理如图 1 所示。图 1 ( ) 中, 为聚焦 X CT OPT