日本血吸虫生殖相关抗原31～32kDa分子的质谱分析与鉴定.pdfVIP

维普资讯 · 168 · 中国血吸虫病防治杂志2008年第2O卷第 3期 ChinJSchistoControl2008，Vo1．2O，No．3 [文章编号] 1005—6661(2008)03—0168—06 · 论 著 · 日本血吸虫生殖相关抗原 3132kDa分子 的质谱分析与鉴定 李林 ，汪世平¨，周帅锋 ，胡少敏。，何卓 ，高冬梅 ，冯明钊。 [摘要] 目的 利用蛋白质组学技术分离、鉴定 日本血吸虫天然分子 31～32kDa抗原组分。方法 收集感染后 32d的日本血吸虫成虫，制备成虫蛋白，经一维电泳、固相 pH梯度双向凝胶电泳分 离，选取31~32kDa附近的蛋白点进行质谱分析鉴定，通过凝胶图像分析软件进行结果 比较。结 果 二维电泳结果显示31～32kDa附近有 13个蛋白点，经 MAIDI—TOF—MS鉴定及分析，发现 3 个蛋白分子分别与曼氏血吸虫Actine-2、日本血吸虫 3一磷酸甘油脱氢酶、曼 氏血吸虫组织蛋白酶B 肽链内切酶有高度的同源性。结论 31～32kDa组分中含有这 3个蛋白点，它们与 日本血吸虫 31 ～ 32kDa天然分子中起保护性的有效分子密切相关。同时，它们的发现也为天然分子疫苗向基 因 工程疫苗的推进奠定了基础。 [关键词] 日本血吸虫；疫苗；蛋白质组学；二维电泳；质谱 [中图分类号] R383．24 [文献标识码] A IdentificationandanalysisofeffectivecompositionsofSchisto- somajaponicum 31—32kDaproteins LiLil，WangShi—pig卜，Zh。“ Shuai—feng ，HuShao-min。，HeZhuo ，GaoDong-mei，FengMing-zhao。 (1XiangyaMedi— calCollege，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China；2TheChineseUniversityofHang Kong，Hnagkong，China) -[Abstract~ Objective ToidentifyandanalyzetheeffectivecompositionsofSchistosomajaponi— culn 31— 32kDaproteinsbyusingthetechniquesofproteornics．Methods Thetotalproteinswere preparedfrom 32～dayadultwormsofSchistosomajaponicum．Aftertwo-dimensional(2一D)geldec— trophoresis，thedistinctproteinspotsfrom2-DgelswereisolatedandanalyzedbyMALDI-TOF-MS． Results A totalof13proteinspots，withintherangeof31— 32kDa，weredetectedinthe2-D gels． Threeofthem hadhighhomologywithActine-2ofS．mansoni，glycerol-3一phosphatedehydrogenase ofS．japonicumandcathepsinBendopeptidaseofS．mansoni．Conclusions The31— 32kDaanti— genscontain3importantantigens：actine-2，glycerol一3一phosphatedehydrogenaseandcathepsinBen— dopeptidase，whichhavebeendemonstratedtOhavecertainprotectiveeffectagainstS．japonicum． Ourfindingscanfacilitatethedevelopmentofmulti-epitopevaccineagainstS．japonicum． -[Keywords] Schistosornajaponicum；Vaccine；Proteomics；Two-dimensionalelectrophoresis； Massspectrum 在我国，日本血吸虫病主要流行于长江流域 以 南的广大地区，不仅危害人类的身体健康，而且影响