利用ISSR分子标记对39份莲藕种质资源的遗传多样性分析.pdfVIP

· 生物技术 · 北方 园艺2011(12)：96～98 利用 ISSR分子标记对 39份莲藕种质资源的 遗传多样性分析 李 长 春 ，戴 余 军，苏 超，李 建 华，田春 元，姚 国 新 (孝感学院 生命科学技术学院，湖北 孝感 432000) 摘 要：采用 ISSR分子标记技术对 39份莲藕品种进行遗传 多样性分析。结果表 明：8个 ISSR引物共扩增出89条带，其中有 55条多态带，平均每个引物扩增的多态性带数为6．88条，多 态性 比率平均为61．8 ；通过遗传相似 系数和聚类分析，能将 39份莲藕品种完全区分开；说明 IsSR标记技术能较好地从分子水平揭示 出莲藕 品种 的遗传多样性 。 关键词：莲藕；遗传多样性；ISsR 中图分类号：S682．32 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2011)12一O096一O3 莲藕(NelumbonuciferaGaertn)属睡莲科莲属 ，是 五”和 “武植二号”采 自孝感外，其他材料均由武汉植物 一 种重要的水生经济作物，在食用、药用、美容健美 、园 园提供，取幼嫩叶片置超低温冰箱 中保存备用。Taq 林绿化以及外贸出口等方面有很大的应用价值和开发 DNA聚合酶 、dNTP、DNAmarker购 自上海生工生物 潜力L1]。经古植物学研究证明，莲属植物在被子植物 工程技术服务有限公司，其它常规试剂采用进 口分装 大家族兴旺之前，距今约 1．35亿年，在北半球许 多水 或国产分析纯。 域地区已有生长分布 ，在长期的进化过程 中出现 了各 表 1 供试材料 种变异类型。莲藕在我国分布广泛 ，几乎遍布全国，栽 培历史悠久 ，种质资源丰富，品种繁多，特别是近 30a 经不同单位的选育与应用 ，莲藕 品种已由2O世纪 8O 年代初的 100多份衍生到 目前 的近 500份 ，品种 间存 在系谱不清 、同物异名等混乱现象，不利于莲藕的可持 续利用_】]。传统分类主要是依据莲藕的形态特征来 划分 ，受环境影响较大 ，鉴定困难 。 ISSR即简单重复序列 区间(Inter-SimpleSequence Repeat)是由Zietkiewiez等 1994年创建的一种分子标记 技术l4]，它结合了SSR和RAPD的优点，以其多态性高， 操作简单，可重复性强、而在水稻、小麦、青麻等不 同作 物遗传多样性分析、指纹图谱构建、品种鉴定等领域 中 被广泛应用 5『]。现采用 ISSR分子标记分析 39份莲藕 种质资源之间的遗传多样性，为合理选择莲藕育种的亲 本和更好地利用现有的种质资源提供参考。 1 材料与方法 1．2 试验方法 1．1 试验材料 1．2．1 基 因组 DNA 的提取 和检测 采用 改 良的 试验所用的39份莲藕材料 (表 i)，除 “白泡”、“三 CTAB法提取莲藕幼嫩叶片中的DNAE ，用琼脂糖凝 胶 电泳和紫外分光光度计检测DNA质量和浓度 。 1．2．2 ISSR引物合成 用于试验 的 100条 ISSR引 第一作者简介 ：李长春 (1976一)，男，湖北广水人 ，硕士，助教 ，研 究 物参照加拿大哥伦 比亚大学提供的序列 ，由上海英俊 方向为植物遗传与生物技术 。E-mail：1cc386@163．com。 生物技术有限公司合成，用提取的莲藕 DNA进行初步 基金项 目：湖北省教育厅优秀中青年人才资助项 目(； 筛选。 湖北省农业资源利用重点(培育)学科资助项 目(鄂学位 (201031 1．2．3 PCR扩增 PCR单管反应体系：2O L反应体 号)。