硫丹对赤子爱胜蚓和白三叶草细胞DNA损伤的研究.pdf

持久性有机污染物论坛2009暨第四届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 硫丹对赤子爱胜蚓和白三叶草细胞DNA损伤的研究 刘伟，朱鲁生+，王军，谢慧，王金花，苏坤昌 1．引言 硫丹是一种世界范围内广泛使用的有机氯杀虫剂，广泛用于粮食、蔬菜、水果、烟草、茶叶等 作物上防治多种害虫。硫丹在环境中具有很强的持久性，生物富蓄积性潜力较大，对生物毒性强， 在环境中可以远距离输送等特点，其对人体健康和生态环境的潜在影响问题在国内外备受关注，研 究其生态毒性非常重要。本文利用彗星试验研究了硫丹对蚯蚓和白三叶草细胞DNA的损伤作用， 从分子水平探讨了其可能的基因毒性。 2．材料与方法 2．1材料和试剂 公司。赤子爱胜蚓购自天津贾立明蚯蚓养殖有限公司，白三叶草种子由山东农业大学草业科学系提 供。 2．2试验方法 (1)蚯蚓染毒方法 称取5009人工土壤于一烧杯中，按不同等级浓度添加硫丹溶液，加水至规定含量，然后放入 d 10条蚯蚓，用塑料薄膜(预先扎孔)封口，置20士O．5℃培养箱中。于药剂处理后第7、14、2l、28 取出蚯蚓进行试验。药剂处理浓度设定为溶剂对照组(丙酮)，0．1，1．0，10．Omg／l(g四个处理。 (2)白三叶草染毒方法 将发芽后的种子培养4周后，选取大小、长势一致的幼苗转移至Hoagland营养液中，并加入 硫丹溶液使其终浓度为O．1，1．O，10．O mg／L，并设溶剂对照组(丙酮)。于药剂处理后第7、14、2l、 28d采集白三叶草叶片进行试验。 (3)凝胶玻片制作流程 中和、染色匕=》观察分析 3．结果与讨论 3．1硫丹对赤子爱胜蚓细胞DNA损伤程度的影响 用CASP软件分析所得随机图像，获得硫丹对蚯蚓体腔细胞DNA迁移尾长的影响，如图1．由 图1可以看出，硫丹O．1，1．O，lO．Omg／l(g三个剂量组对蚯蚓体腔细胞DNA均有损伤作用，而且随 着浓度的增加，彗星拖尾长度随之增加，这说明DNA损伤程度随硫丹的剂量增加而增大。相同浓 度处理下，随着时间的增长，受损细胞的研叮A拖尾长度也随着增大，这说明DNA损伤程度随硫 丹作用时间的增长而增大。与对照组相比，受损细胞的DNA的彗星拖尾长度出现显著性差异(p o．01)。而1．0、lO．Om刚瞻处理组与0．1m∥kg相比，差异也显著(po．05)。 持久性有机污染物论坛2009暨第四届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 120 100 80 量 60 业 嗖 40 20 0 7d 14d 2ld 28d 时间 (}}：与对照组比较，刚．Ol：a，b／踟：组间进行比较，p0．05) 图l硫丹对赤子爱胜蚓体腔细胞DNA损伤程度(尾长)的影响 3．2硫丹对白三叶草细胞DNA损伤程度的影响 用CASP软件分析所得随机图像，获得硫丹对白三叶草叶片DNA迁移尾长的影响，如图2． 舳 ∞ ∞ 如 们 gn，半嗖 如 如 m O 7d 14d 2Id 28d