一株产中性蛋白酶海洋细菌的筛选与初步鉴定.pdfVIP

食品与药品 Food and Drug 2011年第 13卷第03期 89 一株产中性蛋白酶海洋细菌的筛选与初步鉴定 1 2 *1 1 1 1 1 2 2 肖 峰 ，张 浩 ，王 斌 ，闫志勇 ，宋旭霞 ，胡 明 ，侯 云 ，郑德志 ，樊瑞峰 （1. 青岛大学医学院病原生物学实验室，山东 青岛266071；2. 青岛中仁药业有限公司，山东 青岛266329 ） 摘 要：目的 从海洋环境及生物中筛选高产蛋白酶菌株，初步研究其生长特性及酶学特性，为进一步研究开发提供依 据。方法 将从青岛黄海海域的鱼类、贝类、海水、海泥等样品中分离的细菌，用奶粉平板法和Folin-酚法筛选蛋白酶酶 活性较高的菌株，测定该菌株的最佳产酶条件并初步检测其酶学特点，通过形态学、分子生物学鉴定，初步确定种属。 结果 菌株为革兰阴性杆菌，好氧，无芽孢，无荚膜，有鞭毛。奶粉平板上的菌落直径1~2 mm ，圆形乳白色、光滑、边缘 整齐、半透明。根据16S rDNA序列测定和系统发育树分析，初步鉴定该菌为Aranicola p roteolyticus 。该菌生长温度15~37 ℃，最 适生长温度25 ℃。生长pH 5.5~9.0，最适pH 7.5。生长氯化钠浓度0~6 %，最适浓度1 %；所产蛋白酶的最适酶活性温度40 ℃， 最适pH 7.5 。结论 菌株XF-1环境适应性较好，为中度嗜冷细菌。所产蛋白酶为中性蛋白酶。 关键词：Aranicola p roteoly ticus ；嗜冷细菌；中性蛋白酶；海洋；筛选 中图分类号：R TS225.2+4 文献标识码：A 文章编号：1672-979X （2011）00-0089-05 Isolation and Identification of a Marine Bacteria Strain Producing Neutral Protease 1 2 1 1 1 1 1 XIAO Feng , ZHANG Hao , WANG Bin , YAN Zhi-yong , SONG Xu-xia , HU Ming , HOU Yun , 2 2 ZHENG De-zhi ,FAN Rui-feng (1. Lab of Pathogenic Organisms, College of Medicine, Qingdao University, Qingdao 266071, China; 2. Qingdao Zhongren Pharmaceutical Co.,Ltd.Qingdao 266329,China) Abstract: Objective To isolate a protease-producing strain of high yield from the ocean, and make a preliminary study on its growth characteristic and enzymatic property of the protease. Methods A protease-producing strain with the highest enzyme activity was isolated from the sea area of Qingdao, using milk plate and Folin-phenol method for evaluating proteinase activity. The optimal conditio