抗狂犬病毒单克隆抗体研制及应用.pdfVIP

中国动物传染病学报 研究论文 抗狂犬病毒单克隆抗体的研制及应用 廖园园刘汉平王 威彭杏刘 洁朱薇秦红刚漆世华温文生 武汉中博生物股份有限公司武汉 摘 要 应用杂交瘤技术获得 株分泌抗狂犬病毒单克隆抗体细胞株并对其特性进行分 析 经鉴定它们所分泌的抗体类型为 腹水效价为 法和间接免疫荧光检测 结果表明该 株单抗对有良好的特异性对正常细胞及人白蛋白和其 他细胞培养物无非特异性反应 将这些单抗腹水进行 亲和层析纯化后获得的纯化抗体用于制备反 相亲和层析柱并以反相亲和层析法纯化以获得高纯度抗原 应用纯化的建立胶体金免疫层析法 检测抗体血清结果显示与标准法检测比较的总符 合率为 关键词 狂犬病毒 单抗 反相亲和层析 胶体金 免疫层析 中图分类号 文献标识码 文章编号 狂犬病是由狂犬病毒引起 成很大威胁 目前对狂犬病无有效治疗药物 的人畜共患传染病其主要宿主为犬猫等动物 疫苗接种是预防的有效办法但是疫苗接种后是 典型症状为恐水症又称恐水病 本病极为凶 否产生有效的保护抗体开展免疫抗体水平监测 险病死率几乎为 我国是狂犬病的高 是评估疫苗效果的方法之一也是动态监测动物 发国家 免疫效果的主要途径 居世界第二位仅次于印度 根据部 为建立敏感特异快速 分区域调查我国家犬带毒率为 外 的检测方法提高检测结果的可靠性本研究建 观健康犬的脑内带毒率约 对人类的健康造 立了分泌单克隆抗体 的杂交瘤细胞 收稿日期 作者简介 廖园园女硕士主要从事动物病毒体外诊断试剂的研究 通讯作者 刘汉平 年 月 中国动物传染病学报 株并对 进行鉴定 将获得的 对 杂交瘤细胞株的建立按常规方法 将免 抗原进行反相层析纯化利用纯化 抗原建立 疫的小鼠脾细胞和 进行细胞融合间接 胶体金免疫层析法 法和间接免疫荧光法筛选有限稀释法连 续克隆 以此来检测抗体血清 次 阳性孔细胞体外连续传代 个月 材料和方法 单抗类和亚类测定用抗原依赖分型