猪传染性萎缩性鼻炎实验室诊断技术.pdfVIP

畜牧与饲料科学 AnimalHusbandryandFeedScience 2010，31(5)：189—190 猪传染性萎缩性鼻炎实验室诊断技术 孙运 华 (安徽省砀 山县畜牧兽医水产局 ，安徽 砀山 235300) 摘要 ：从病科的采集和处理、细菌的分离培养、特性鉴定rX-及血清学诊断技术方面，对猪传染性萎缩性鼻炎的实验室诊 断技术进行 了介绍，以期为该病的诊断提供参考。 关键词 ：实验室诊断；传染性萎缩性鼻炎；猪 中图分类号 ：$858．285．1 文献标识码 ：A 文章顺序编号 ：1672—5190(20l0)05—0l89—02 1 病料 的采集和处理 45~折射光用实体显微镜扩大 10倍观察 ，菌落呈特征性 的 1．1 病料 的采集 活体采样时 ，将猪保定后 ，用酒精棉球 橘红色或灰红色光泽 ，结构均质 ，即F。荧光型或 F。类似菌 将鼻孑L周围消毒 ，最后用较干燥的酒精棉擦拭 ，避免鼻孑L周 落 。间有变异型菌落 ，光泽变浅或无光泽 ，有粗纹或结构粗 围有多余的残留酒精而影响病原分离。然后用比较柔软的 糙 ．或夹有浅色分化扇状 区等 。 棉头拭子，轻轻捻动插入鼻腔采取鼻汁样 ，拭子深入鼻腔的 3 特性鉴定 深度相当于鼻孔至眼角 的长度。应该于两侧鼻腔分别采取 3．1 支气管败血波 氏杆菌的鉴定 鼻拭子样。尸体采样，可在剖检观察鼻甲骨萎缩病变时 ，用 3．1．1 生化特性 ：分离平板上的典型单个菌落，划线接种于 灭菌棉拭子采样。 绵羊血改良鲍姜 氏琼脂平板 ，在 37℃潮湿温箱中培养40～ 1．2 病料的处理 如果不能立即接种培养基 ，应将鼻汁拭 45h进行纯培养 ，再做进一步鉴定。支气管败血波氏杆菌为 子放在试管中，装于冰瓶送检或者放于冰箱中冷藏待检 ，最 革兰 氏阴性小杆 菌或球杆菌 ．氧化一发酵 (O／F)试验 为阴 好于当 日涂抹接种培养基。 性 ．即非氧化非发酵型严格需氧菌。接种糖管在 37℃培养 3～ 2 细菌的分离培养 5d．观察记录结果 ：对包括乳糖 、葡萄糖 、蔗糖在 内的所有糖 所有病料拭子分别接种在 已干燥的分离培养基上。该 类都不氧化 、不发酵、不产酸 、不产气 ；能迅速分解蛋白胨明 病的原发性感染因子是支气管败血波氏杆菌和多杀性巴氏 显产碱 ；在糖管的液面上有菌膜形成 ；靛基质试验阴性 ；硫 杆菌。分离支气管败血波 氏杆菌 ，使用含血红素呋喃唑酮的 化氢试验阴性或弱 阳性 ；MR及 VP试验均 阴性 ；能还原硝 改 良麦康凯琼脂平板 ：分离多杀性 巴氏杆菌，使用含新霉 酸盐 ；尿素酶试验和枸橼酸试验明显阳性 ；不能液化 明胶 ； 素、洁霉素的马丁琼脂平板。接种时应尽量将拭子上的分泌 石蕊牛乳产碱 、不消化。 物浓厚涂抹于培养基上。重要检疫 ，如对种猪检疫或进出口 3．1．2 菌相鉴定 ：支气管败血波 氏杆菌在上述绵羊血改 良 检疫 ，用每份鼻腔病料接种2个 同种培养基。环境污染严重 鲍姜 氏琼脂平板上 ，I相菌菌落小 ，光滑 ，乳 白色，不透明， 的猪群，每份鼻腔拭子病料分别做浓涂接种和稀涂接种。 边缘整齐 ，隆起呈半 圆形或球状 ，用铂金圈钩取时质地致密 2．1 支气管败血波氏杆菌的分离培养 分离支气管败血 柔软，易制成均匀菌悬液。菌落周围有明显的B溶血环。做 波氏杆菌的改良麦康凯琼脂平板 ，于37℃培养4O～72h。支 活菌玻片凝集定相试验 ．对 K抗血清呈迅速的典型絮状凝 气管败血波氏杆菌菌落不变红 ，直径约为 1～2mill，光滑 、圆 集 ，对 O抗血清完全不凝集。Ⅲ相菌菌落扁平 ，光滑，透明度 整 、隆起 、透