血虚证小鼠模型造模方法及四物汤干预作用.pdfVIP

血虚证小鼠模型造模方法及四物汤的干预作用 2002207229 刘鲁炯 02 医（七） 摘要：血虚证是中医临床上常见证候，多由生血乏源、失血过多、肾精亏损、大病之后等引起。 环磷酰胺、乙酰苯肼是对小鼠进行血虚证造模的常用方法。本实验旨在比较血虚证不同造模方 法的优劣，评价中药复方四物汤的疗效。 关键词：血虚证；造模；环磷酰胺；乙酰苯肼；四物汤 1、材料与方法： 1 实验材料 1.1 药物或试剂 乙酰苯肼（APH ，为白色粉末状固体，用时配制成2 ％溶液）、 环磷酰胺粉针剂：200mg×10 支×1 盒（用时配成 10mg/ml 溶液）、 无水乙醇 500ml×1 瓶、0.9%氯化钠溶液 500ml×1 瓶或 250ml×1 瓶。 Bouin 氏液（自配） 1.2 仪器或设备 50ml/100ml 柱形小烧杯各 2 个，50ml/100ml 量筒各 1 个，10ml 刻度吸管 2 个，吸球 2 个， 1ml、5ml 一次性注射器数支，玻璃棒 1 根，标签纸，锡箔纸，小鼠灌胃针 2 支。75ml ⁄ 100ml 柱形小烧杯各 1 个， SQF-EA 体视显微镜，以及自制显微镜与数码相机接口； MP200B 型电子 天平或 ACS-6A 型计价电子秤； NIKON Coolpix4500 数码相机；YLS-13A 大小鼠抓力测量仪； 自制光源装置：3200K-250W 摄像专用光源;数字 WMY-01 型温度计；相机三脚架，划有小方格 的透明薄膜纸及改造的小鼠移动笼具等 1.3 实验对物：昆明种小鼠40只。体重(25 ±2)g ，雄性，上海中医药大学实验动物中心提供。 2、实验方法 2.1 ．动物分组 随机分为正常对照组 A 、环磷酰胺模型对照组 B 、乙酰苯肼模型对照组 C、乙酰苯肼四物汤 治疗对照组 D 等 4 组，每组 10 只。分笼饲养于内铺垫料的塑料笼。 2.2. 造模及给药方法 造模时间及给 药 2007.3.14 （第一天） 2007.3.15 （第二天） 2007.3.17 （第四天） 组别 腹腔注射生理盐水 0.25ml 腹 腔 注 射 生 理 盐 水 皮下注射生理盐水 A 皮下注射生理盐水 0.21ml 0.25ml 0.225ml 腹腔注射 10mg/ml 环磷酰 腹腔注射 10mg/ml 环磷 皮下注射生理盐水 B 胺注射液 0.25ml 酰胺注射液 0.25ml 0.225ml 皮下注射生理盐水 0.21ml 皮下注射 2 ％乙酰苯肼溶 腹 腔 注 射 生 理 盐 水 皮下注射2 ％乙酰苯肼 C 液 0.21ml 0.25ml 溶液 0.225ml 腹腔注射生理盐水 0.25ml 皮下注射 2 ％乙酰苯肼溶 腹 腔 注 射 生 理 盐 水 皮下注射2 ％乙酰苯肼 D 液 0.21ml 0.25ml 溶液 0.225ml 腹腔注射生理盐水 0.25ml 2.3 、四诊检测 3.14，3.17，3.21 共观察 3 次，分别测量体重、腋温、爪尾 r 、抓力、饮水、摄食、旷场。 2.4 、病理组织切片的制作 1 2.5 、舌苔，小肠、胃粘膜舌、胸腺、脾、胃、肝、十二指肠等 6 种脏器读片 3 、实验结果 （1）四诊：体重、腋温、爪尾r 、抓力、饮水、摄食、旷场 外在表观：14 号开始造模，16 号开始乙酰苯肼组和四物汤小鼠爪尾肉眼可辨颜色变白，爪 形变瘦。环磷酰胺组 19 号颜色变化仍不明显，但毛发稀疏。到 21 号环磷酰胺组爪尾才出 现肉