利用ISSR分析21份毛叶枣种质的亲缘关系.pdfVIP

rl~TF；rJJ／子 很 zulz，jjl(11)：2018-2023 ChineseJournalofTropicalCrops 利用 ISSR分析 21份毛叶枣种质的亲缘关系 陈佳瑛 ，胡会刚 ，谢江辉 ，刘魁英 1中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 ．广东湛江 524091 2广东海洋大学农学院．广东湛江 524088 摘 要 为探讨收集保存的毛叶枣种质的亲缘关系．运用正交设计建立优化毛叶枣 ISSR反应体系。结果表明： 即25 LPCR体系中含 2．5 L的 IOxPCRBuffer、3．75 L的2．5mmolL／dNTPs、1．5 L的0．5U／I~LTaq酶、1．5 L 的5 n1L／引物 ，0．75 L的 100n LDNA。然后利用 ISSR标记对 21份毛叶枣材料进行分类研究 ，并从 100 条引物中筛选 l3条扩增条带数量丰富、清晰、稳定的弓l物用于亲缘关系分析 。结果显示 ：共扩增条带 98条 ， 其中多态性条带 78条，多态性百分率 85．7％：根据 ISSR扩增结果，21份材料遗传相似系数范围为 0．5l～0．9O。 通过UPGMA法进行聚类分析 ，在遗传相似系数 0．67水平 ，21份毛叶枣种质可分为 3类：第 1类为蜜丝枣 1个 种质：第 Ⅱ类均来 自台湾品种群。有 17个种质；第Ⅲ类滇刺枣野生种、缅甸长果种和缅甸圆果种。大多数品种 间相似性系数在 0．67以上 ．说明保存种质的遗传多样性较低。 关键词 毛叶枣；ISSR；种质 ：亲缘关系 中圈分类号 $667．9 文献标识码 A GeneticRelationsAnalysisof21Zizyphus mauritianasby ISSR Markers CHEN Jiaying，HU huigang，XIE Jianghui，LIU Kuiying~ 1SouthSubtropicalCropResearchInstitute，CATAS，Zhanjiang,Guangdong524091，China 2CollegeofAgriculturd，GuandongOceanuniversity,Zhanjiang,Guangdong524088,China Abstract A geneticanalysisof21diverseZizyphusma~ritiana accessionswasperformedusing ISSR marker．The orthogonaldesign was used to optimize the ISSR—PCR amplification system on Z mauritiana．The optimal componentsofthePCR system (25~L)were：2．5IxLofIOxPCRbuffer，3．75 L0f2．5mmol／LdNTPs，1．5 L0f0．5 U／I~LT~DNA ploymerase，1．5 Lof5 In几 primer,0．75 Lof100n LDNA and15 LddH202．Twenty-one z mauritiana specieswereclassifiedby ISSR makers．Thirteen primers were selected from 1o0primersandused for ISSR amplification．Ninety-eightbandsweregenerated，78 ofwhichwerepolymorphicbands(thepercentageof polymorphicband，PPB=85．7％)．rhegeneticsimilaritycoefficientwas0．51to0．90accordingtoISSRamplification． Th e clustering dendrogram was constructed by UPGMA method to explore the taxo