沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响.pdfVIP

沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响.pdf

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第33卷 第 6期 中山大学学报 (医学科学版) Vo1.33 No.6 2012年 11月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Nov 2012 沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株 CNE一2放射 敏感性的影响 牛道立 卜,李建锋 ,何 芬 ,邹俊涛 。,周琼芳 ,魏 旋 ,李 杨z,陈龙华 ·’ (1.南方医科大学附属南方医院放疗科,广东广州 510515;2.广州医学院第一附属医院放疗科,广东广州510070;3.中山 大学中山医学院人体解剖学教研室,广东广州 510080) 摘 要:【目的】探讨沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞(CNE一2)放射敏感性的影响,寻求放射治疗鼻咽癌的新方法。 方【法】首先利用 siRNA预测软件得到3条 siRNA序列,并制备合成 siRNA片段,利用RT—PCR和免疫印迹法检测其沉默 Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果最佳的siRNA片段,转染CNE.2细胞后观察其对CNE一2细胞p53基因表达的影响、 M1rI1法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的凋亡、克隆形成法检测转染 siRNA联合放射处理后细胞的放射增敏比。 【结果】成功筛选出了沉默效应最佳的siRNA片段,转染CNE一2细胞后能显著降低其Pokemon基因的表达、提高p53基因的 表达、降低细胞的增殖活性、加速细胞的凋亡,同时增加了CNE一2细胞的放射敏感性。结【论】沉默Pokemon基因能增加鼻咽 癌CNE.2细胞的放射敏感性。这为临床鼻咽癌的放射增敏治疗提供了新思路。 关键词:Pokemon基因:鼻咽癌;放射敏感性 中图分类号:R73 文献标志码 :A 文章编号:1672.3554(2012)06—0733—06 InfluenceofSilencingPokemonGenewithsiRNA onRadiationSensitivityofCNE-2Cell NIUDao—li,,LIJian-feng2,HEFen,ZOUJun—tao,ZHOUQiong-fang2,WEIXuan,LIYang2,CHENLong-hua’ (1.DepartmentofChemotherapy,NanfangHospital,NanfangMedicalUniversity,Guangzhou510515,China;2.Departmentof Chemotherapy,TheFirstAffiliatedHospital,GuangzhouMedicalCollege,Guangzhou510070,China;3.DepartmentofHuman Anatomy,ZhongshanMedicalUniversity,SunYat—senUniversity,Guangzhou510080,China) Abstract:O【bjective】Toinvestigatetheeffectofpokemongeneknockdownonradiationsensitivityofnasopharyngealcarcinoma cell(CNE一2). M【ethods】ThreesiRNAsequencesweredesignedthroughsiRNApredictionsoftware,andthebestsiRNAwas screenedbydetectingtheexpressionofPokemonwithRT—PCR andWesternblotting.AfterthesiRNAwastransfectedtoCNE一2ceils, thep53 expressionwasinvestigated, and thecellproliferationwasdetectedbyMTF, and theapoptosiswasdetectedbyflow eytometry,andtheradiosensitizationratiowasdetectedbycloneformation. R【esults】ThebestsiRNAwassuc

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