蛋白变性剂对多聚半乳糖醛酸酶及其化学修饰酶催化活性的影响.pdfVIP

第26卷第 6期 高 校 化 学 工 程 学 报 No．6 、，01．26 2012 年 l2月 JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversities Dec． 2012 文章编号：1003·9015(2012)06—1009-05 网络出版地址：hap：／w／ww．cnki．net／kcms／detail／33．1141．TQ1027．001．html 蛋白变性剂对多聚半乳糖醛酸酶及其化学修饰酶催化活性的影响 刘小林 ，一，伍志权 ，黄 磊 ，黄卓烈 ，黎春怡 (1．宜春学院 生命科学学院，江西 宜春 336000； 2．华南农业大学 生命科学学院，广东 广州 510642；3．江西宜春中学，江西 宜春 336000) 摘 要：为了探索几种蛋白质变性剂对多聚半乳糖醛酸酶的作用效果，以水溶性低分子量壳寡糖(cos，分子量约5000) 作为修饰剂对已纯化的多聚半乳糖醛酸酶(PG)进行化学修饰，得到纯化的化学修饰酶(COS．PG)，然后，测定不同蛋白 变性剂(尿素、盐酸胍、SDS和苯酚)对纯化的PG和COS．PG催化活性的影响。结果表明，修饰后COS—PG的比活性 是340．10U·(ragprotein)一，比修饰前的PG提高了153％，COS．PG的糖含量比PG提高了43．11％，COS．PG的氨基修 饰率为 32．85％。SDS(十二烷基硫酸钠)、苯酚对 PG和COS．PG活性有抑制作用，lmmo1．L 的SDS分别抑制了PG 和COS-PG活性的8O．99％和 91．14％。10mmo1．L 的苯酚分别抑制了PG和COS．PG活性的34．08％和 3270％。低浓度 的尿素和盐酸胍对PG有激活作用，5mmo1．L 的尿素使PG活性提高 157．79％，3mmo1．L 的尿素使COS．PG 的活性 提高67．32％。2mmolL· 的盐酸胍使PG活性提高 57．64％，rlmmo1．L-的盐酸胍使COS．PG的活性提高 576％。 关键词：多聚半乳糖醛酸酶(PG)；蛋白变性剂；壳寡糖(cos)；化学修饰 中图分类号：Q557．9；Q936 文献标识码：A DOI：10．39690．issn．1003．9015．2012．06．017 EffectsofProteinDenaturantsontheActivitiesofPolygalacturonaseandChemically M odifiedPolygalacturonase LIUXiao．Lin ，， WU Zhi．quan， HUANG Lei， HUANG Zhuo—lie， LIChun-yi (1．ColleagueofLifeScience，YiChunUniversity，Yichun336000，China； 2．CollegeofLifeSciences，SouthChinaAgriculturalUniversiyt，Guangzhou510642，China； 3．YichunMiddleSchool，Yichun336000，China) Abstract： Inordertoinvestigatetheeffectsofseveralproteindenaturantsontheactiviytofpolygalacturonase nadmodifiedpolygalacturonase，thelowmolecularchitosna (cos，MW about5000)wasusedtomodifythe purifiedpolygalacturonase(PG)togetchemicallymodifiedpolygalacturonase(COS-PG)andfourdenaturants (urea,guanidinehydrochloride，sodiumdo