基于T-Hg^2＋-T及G四聚体自身熄灭能力的“Turnon”型单标记DNA荧光探针用于碘离子的检测.pdfVIP

Vo1．33 高等 学校 化 学 学报 No．12 2012年 12月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 2651～2656 基于 T．Hg2+．T及 G 四聚体 自身熄灭能力的 “Turnon型单标记 DNA荧光探针 用于碘离子的检测 朱 颖，刘 沛，羊小海，何磊 良，李清照，王 青， 王柯敏 ，黄 晋 ，刘剑波 (湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室，化学化工学院， 生物纳米与分子工程湖南省重点实验室，长沙410082) 摘要 利用G四聚体可以熄灭荧光的特性以及T—Hg一T的特殊结构 ，发展了一种简便的 “Turnon”型碘离子 检测新方法．设计了一条5端标有荧光基团的富T序列 ，3端采用能形成 G四聚体的富G序列代替传统的 熄灭基团．加入汞离子后，富T序列形成T—H 一T机构发生折叠，G四聚体靠近荧光基团，发生光诱导电子 转移，使荧光被熄灭．若加入碘离子，碘离子会与汞离子形成较稳定的配合物，汞离子从 DNA上被竞争下 来，探针的荧光得以恢复，且荧光强度与 50～500nmol／L的碘离子呈良好线性关系，检出限为30nmol／L． 本方法选择性好，10倍于碘离子浓度 的其它常见阴离子干扰较小．检测 自来水样 中碘离子的回收率为 92％～109％，相对标准偏差RSD4％(n=4)． 关键词 碘离子；荧光 ；DNA探针；G四聚体 中图分类号 0657 文献标识码 A doi：10．7503／cjc 碘是人体必需的微量元素之一，可以维持人体基本生命活动和脑垂体的生理功能，促进人体发 育．碘缺乏会危害婴儿脑发育和成人大脑的功能，严重缺乏将导致碘缺乏病，如甲状腺肿大和克汀病 等 ¨工J．因此，发展一种高灵敏高选择性的能用于检测食品、药剂及生物样品中碘离子的简便方法具有 重要意义．目前，检测碘的传统方法较多，包括原子吸收光谱法 J、毛细管电泳 J、离子选择性电 极 J、离子色谱法 J、气相色谱一质谱法 (Gc—Ms) 和电感耦合等离子体质谱 (ICP—MS) 等．但这些 方法大都较为复杂，成本较高，费时且难以实现在线实时监测． 近年来 ，荧光探针由于具有高灵敏度、高选择性和简便快速等优点，被广泛用于各种物质的检 测 ．迄今，已发展了多种基于碘离子重金属效应的 “Turnoff”型碘离子荧光传感器，这些荧光物质 包括咪唑口 、苯并咪唑类衍生物 J、含咔唑的共轭聚合物 、阳离子聚乙烯衍生物 以及硫脲型 配体修饰的量子点 等．对于荧光检测，“Turnon”模式优于 “Turnoff”模式，因为 “Turnoff”容易被样 品中存在的其它荧光熄灭剂干扰而造成假阳信号，导致较低的信背比．然而，由于碘离子的重原子效 应的影响，构建一种 “Turnon”型的碘离子荧光传感器较难． 由于碘离子与某些金属离子具有较强的配位作用，研究人员发展了基于碘离子配位化学的 “Turn on”型碘离子荧光传感器 以 ，如Lin等 合成了香豆素吡啶酮并作为荧光探针用于碘离子的检测， 当加入铜离子时，该复合物的荧光被熄灭，再加入碘离子，荧光得以恢复，碘离子的检出限为 107 收稿 日期：2012~4—16． 基金项 目：国家 自然科学基金 (批准号20805012)、科技部国际合作重大项 目(批准号：2010DFB30300)和教育部 “新世 纪优秀人才支持计划”(批准号：NCET-09-0338)资助． 联系人简介 ：王柯敏，男，博士，教授，博士生导师，主要从事纳米及分子水平上的生物分析化学及纳米生物研究． E—mail：kmwang@hnu．edu．cn 羊小海，男，博士，教授，博士生导师，主要从事纳米及分子水平上的生物分析化学研究． E．mail：yangxiaohai@ hnu．edu．CB 高 等 学 校 化 学 学 报 nmo