一种检测发酵乳中嗜酸乳杆菌的定量定性方法.pdfVIP

检测分析 F Wl，■ ●■ … 一_．… jo《dResearchAndDevelooment 第33卷第 11期 l53 ==I 一 种检测发酵乳中嗜酸乳杆菌的 定量定性方法 包秋华 ，李梅花 ，徐洁，张家超 ，张和平 (内蒙古农业大学 乳品生物技术与工程教育部重点实验室，内蒙古 呼和浩特 010018) 摘 要：根据乳酸菌的 16SrDNA基 因序列设计嗜酸乳杆菌种特异性引物，应用种特异性PCR和实时荧光定量PCR 反应 ，通过琼脂糖凝胶 电泳 图谱和实时荧光定量 PCR图谱分析 ，建立快速 、准确地检测发酵乳 中L．ocidophilus的定 量和 定性方法。 关键词：益生菌；嗜酸乳杆菌；种特异性PCR；实时荧光定量PCR反应 StudyontheMethodsofQualitativeandQuantitativeDetectionL．acidophilusintheFermentedMilk BAOQiu-hua，LIMei-hua，XUJie，ZHANGJia—chao，ZHANGHe—ping (KeyLaboratoryofDairyBiotechnologyandEngineeringMinistryofEducationministryInnerMongolia AgriculturalUniversity，Hohhot010018，InnerMongolia，China) Abstract：Accordingto16SrDNA genesequenceoflacticacidbacteria，thespecies—specificprimerofL． acidophiluswasdesignedandusedtoCalTyoutPCR andfluorescentquantitativeReal—TimePCR．Through analyzingtheelectrophoreticpatternandthecurveofRT—PCR，arapidqualitativeandquantitativemethodfor thedetectionofLactobacillusrhoJTl,nos inthefermentedmilkwasestablished． Keywords：Probiotics；．aeidophilus；species—specificPCR；real-TimePCR 嗜酸乳杆菌(．acidophilus)是一种人体肠道中的 菌产品质量的监督力度不够 ，特别是对多菌复合的复 重要微生物，与人体健康息息相关，当其达到一定数 杂样本 中三．acidophilus的定性、定量检测方面缺乏科 量时，能改善或调节肠道微生物菌群的平衡，增强机 学、合理、快速的方法。传统方法易受培养条件、菌种 体免疫力，降低胆固醇水平 ，缓解乳糖不耐症以及抑 特性等因素影响，检测效率有限。PCR技术和 Real— 制肿瘤细胞的形成等，即起到健康促进效果I】’21。目前 TimePCR技术具有特异性强、重复性好、准确、快速等 国内外开发的含有嗜酸乳杆菌的乳制品种类繁多 ，且 优点 ，成为了微生物学领域检测的重要方法 q。因此 其多与嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌等多菌种混合发 建立一种准确的定性 、定量方法来分析评价发酵乳中 酵嘲。大量的研究表明，益生菌在进入消化系统后 ，其 是否存在 L．acidophilus及其 中的有效活菌数势在必 活菌含量必须达到 lxlOcfu／mL以上才能发挥其健康 行。 功效，因此要求新鲜的益生菌制品中活菌数量不得低 于 lx