两种同时提取小麦根腐离蠕孢菌DNA和RNA的方法比较.pdfVIP

两种同时提取小麦根腐离蠕孢菌DNA和RNA的方法比较.pdf

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中圊磨学通报 2011,27(15):277-280 ChineseAgriculturalScienceBulletin 两种同时提取小麦根腐离蠕孢菌DNA和RNA的方法比较 王 珍 ,崔素萍 ,崔丽琴 ,左豫虎 (黑‘龙江八一农垦大学,大庆 163319;黑龙江贝因美乳业有限公司,安达 151400) 摘 要:获得足够数量和高质量的RNA和DNA是进行分子生物学研究工作的基础。以小麦根腐离蠕孢 茵为原料 ,分别采用溶茵酶法和液氮研磨法破碎真菌细胞壁提取DNA,用琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收及 聚合酶链式反应 (PCR)技术进行核酸完整性和纯度检测。结果表明:2种方法在提取DNA时都同时得 到了高质量的RNA;PCR检测结果表明DNA完整性比较高,2种方法得到的DNA质量相当;溶茵酶法 中得到的RNA质量优于液氮法。利用溶茵酶破壁法提取小麦根腐离蠕孢茵DNA的提取体系可用于 RNA的提取,为小麦根腐离蠕孢茵核酸的DNA和RNA的同时提取提供了一种简便、安全、可行的方 法 。 关键词:小麦根腐离蠕孢茵;核酸;溶茵酶;提取方法;聚合酶链式反应技术 中图分类号:Q7,Q52 文献标志码:A 论文编号:2010.3404 ComparingTwoMethodsforSimultaneousExtractionofDNA andRNAforBipolarissorokinianum WangZhen ,CuiSuping,CuiLiqin~,ZuoYuhu (Hei~ngfiangBayiAgriculturalUniversity,Daqing163319; 2HeilongjiangBeingraateDa IndustryLimitedCompany,Anda151400) Abstract:Obtainingsufficientquantityand highquality ofRNA and DNA isthebaseforcarryingout researchesinmolecularbiology.DNAfrom Bipolarissorokinianawasattractedbytwocellwalllysismethods usinglysozymeandliquidnitrogengrindingmethods,respectively.Integralityandpurityofnucleicacidswere detectedwithagarosegelelectrophoresis,ultravioletabsorptionandPCR.Idealresultswereobtained,when extractingDNA,highqualityRNA wasobtainedatthesametime,byusingbothmethods.TheresultsofPCR indicatedthattheintegralityofDNAwasgood,Th equalityofDNAwassimilarforthetwomethodsused,while hteuq alityofRNA wasbetterwhenextractedwithlysozymethanitwithliquidnitrogengrinding.TheDNA extractionsystem ofBipoladssorokinianabyusinglysozymemethodwassuitableforRNA extraction,it providedasimple,safeandfeasiblemethodofrextractingbothDNAnadRNAatthesametimefrom Bipolads sorokiniana. Keywords:BipolarisSorokinianum;Nucleicacid;lysozyme;extractionmethod;PCR 0弓I言

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