分泌型Survivin真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达.pdfVIP

第29卷 第6期 暨南大学学报(医学版) VO1．29 No．6 2008年 12月 JournalofJinanUniversity(MedicineEdition) Dec． 2oo8 分泌型 Survivin真核表达载体的构建及其 在 HeLa细胞中的表达 韩 捷 ， 施焕敬 ， 徐丽慧2， 卢宏松 ， 何贤辉 (暨南大学生命科学技术学院 1．组织移植与免疫实验中心；2．生物工程研究所，广东广州510632) [摘 要] 目的：构建含6个组氨酸标签(His)的小鼠存活素(Survivin)融合蛋白的真核表达载体，及其在真核细 胞中的表达。方法：根据小鼠Survivin序列设计引物，经过RT-PCR克隆Survivin的eDNA并进一步构建分泌型Sur- vivin的真核表达载体，经测序鉴定后在大肠杆菌中扩增在 HeLa细胞中表达；以金属离子螯合层析富集，再用免疫 印迹法鉴定。结果：克隆到Survivin编码区全长序列，经D