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生物物理学报 第二十四卷 第六期 二oo八年十二月 ACTA BIoPHYSICA SINICA V01．24 N0．6 Dec．20O8 绿色荧光蛋白——发现、表达和发展 M ansEhrenberg (D印∞c脚n ce 矾d fecuf Boz B c，CPsⅡfⅡf／，咖e S den) 罗文新， 夏宁邵 (译) (厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心) 由于在发现和研究绿色荧光蛋白方面做出的贡 的神奇特性 。在 GFP一级结构中的一个三肽基序 献，日本科学家下村修 (OsamuShimomura)、美 自发形成该发色基团，在表达GFP的各种生物体 国科学家马丁 ·沙尔菲 (ManinChalfie)和美籍华 中，荧光可 以自发产生 。换言之，GFP中基于三 裔科学家钱永健 fRoserY Tsien)共 同获得 了 肽 的发色基团的成熟需要的只是氧分子，无需任何 2o08年度的诺贝尔化学奖。 酶和辅助因子的存在。因此，GFP及其变体提供 20世纪期间，生物化学成为探索活体细胞合 了通用的遗传标签，可以在各种活体系统中观察大 成代谢、分解代谢基本原理的主要手段。2O世纪 量的时空过程。GFP给生物科学带来的变革也大 也见证了一场进步和变革：我们能够了解各种酶的 大加快了定量光学显微镜、电子学、计算科学和用 功能，并通过晶体学及核磁共振从原子层面揭示蛋 系统生物学方法研究细胞内外生物过程的分子模建 白质的结构 。20世纪后半叶，基于飞速发展的各 的发展。 种生物的全基因序列测定，传统遗传学和核酸化学 下面，将从六个方面进行介绍：1)来 自维多 融入了现代基因组学中。生物信息学及其他辅助技 利亚多管水母的GFP的基本特征；2)来 自其他生 术推动了这一遗传学革命，并波及生物科学的各个 物体的天然相关蛋 白及GFP家族成员突变体的基 领域，对医学、制药学和生态学都产生了实际的影 本特征；3)GFP类似蛋 白产生重要影响的一些科 响。然而，不论是生物化学或者遗传学的革命都未 学领域；4)GFP蛋 白的发现；5)GFP蛋 白可 以 能提供一种实验工具，用以定量并在实验中从时 在其他非维多利亚多管水母中表达并产生荧光的验 间、空问上精确地监控分子水平的胞 内或胞外过 证；6)GFP家族成员突变体的设计及其成为用于 程，从而确定所有活体系统的动态行为。为获得这 活体系统时空过程检测的通用工具。后面三部分与 些认识，实验方面及概念上的新工具必不可少。如 获得2o08年诺贝尔奖直接相关。 今，在 2l世纪初 ，分离 自维多利亚多管水母的绿 色荧光蛋 白 (greenfluorescentprotein，GFP)，以 1GFP蛋白的性质及其荧光发色基团 及分离 自其它生物体的类似蛋 白或者经改造获得的 突变体构成的 “GFP家族 ”蛋 白，使这一工具得 来 自维多利亚多管水母的天然绿色荧光蛋 白 到飞速发展 。 (GFP)，最先 由Mo“n和 Hastings命名，它包含 这些GFP类似蛋白可 以用于在空问和时间上 238个 氨基酸 。GFP序 列 中的 65～67位残基 监控活细胞和生物体 内的大量生物现象，例如基因 (Ser．Tyr—Gly)自发形成荧光发色基团——对羟基苯 表达、蛋 白质定位和动力学、蛋 白质相互作用、细 咪唑啉酮