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文献综述
有机物对发光菌Q67的急性毒性研究
一、引言:
随着工农业生产的不断发展、城镇建设规模的日益扩大全球环境污染日趋严重,化学品的环境污染更为突出。据报道,全球目前大约有lO万多种合成化学品释放进入环境中成为环境毒物,而且还每年以1000种新的化合物的速度在递增[1]入环境中的化学物质大部分是人工合成的,这些物质的使用给人类的物质生活带来巨大便利的同时,也不可避免地进入到环境中,从而给环境带来污染[2]。美国环保局(EPA)水质调查发现供水系统中有机污染物2110种,饮用水中含765种。1994年以来,美国在饮用水中发现了100多种合成有机物,如多氯联苯、多环芳烃等,具有“三致”作用。关于水环境中有机物的降解问题已迫在眉睫。目前关于有机污染物对水环境造成影响的研究工作,国内开展了很多研究,目前用得较多的检测污染生物毒性的方法是从医学毒理学的方法引用过来的小鼠或是鱼类或是藻类毒性实验。由于时间长,成本高,而不易普遍推广应用。20 世纪80 年代发展起来的Microtox方法,采用发光细菌作为毒性测试的指标生物,根据测定发光强度的减弱程度,判断污染物的毒性强弱,大部分有机污染物对发光细菌毒性与对多种水生生物的毒性明显正相关[3]。发光菌的急性毒性检测由于其耗时短、成本低、反应灵敏,从而在水环境的检测中有很强的实用性和可推广前景。
二、生态毒理学测试方法研究现状
生态毒理学测试法可以弥补化学方法的不足,在一定程度上能预测毒物之间的相互作用。生态毒理学是七十年代发展起来的一门新兴的边缘学科,主要研究污染物—环境一机体三者之间的关系以及有毒物质对生物在个体、种群、群落和生态系统水平上的毒性效应。以前毒性方面的许多研究工作是用水生态系统食物链中各代表性生物如藻、蚤、鱼进行急、慢性实验,并用这些结果作为评价环境化学物质的毒性强度及可能对生态系统造成影响的一种指标,现在这些方法很多都已作常规检测方法,但它存在耗时长、花费大、只能反映对个体和群落的后期影响等问题。而发光菌的急性毒性试验能与现代光电检测手段相匹配,具有测试快速,经济,节省空间且可靠等优点而备受关注。
三、菌种的选用
在发光菌毒性测试中应用最广泛的是海洋发光细菌(Photobactedum phosporum),由于其生存环境中需要大量的离子,在进行环境样品生物毒性测试时需要人为加入一定量的NaCI(2%~3%),这对测试淡水体系样品中污染物毒性显然存在一定的局限性和矛盾。国内以有很多学者都开始应用青海弧菌(Vibrio qinghaiensis sp.Nov.)进行研究。该菌具有在淡水体系中发光的特点,具有很大的应用潜力,目前已取得较好的效果[4]。
青海弧菌是我国学者于1985年8月从青海湖的裸鲤体表分离得到的一种发光细菌[5]它在NaCI浓度为l%时生长最好,在8%时为生长的上限,表明它有较高的耐高渗透压的能力,实际上它不需要NaCI的存在即可良好发光(对Na+的依赖性是海洋细菌的重要特征)。温度适应范围广,1035度均能发光。在pH值为6.511.0的范围内能生长和发光,尤其在pH=9左右生长和发光最佳。它的生物发光光谱峰值在484nm左右,发光峰半高宽约90nm,发光频谱范围为420---660nm.对金鱼的感染试验表明它为非致病菌。
四、发光菌检测法的应用
发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌。在一定条件下发光细菌的发光强度是恒定的,与外来受试物接触后,其发光强度将有所改变,在一定浓度范围内,有毒物浓度大小与发光细菌发光强度变化成一定比例关系,用发光检测仪测出它与待测物作用前后的光强变化,就可以推算出综合毒性的大小[6-8]由于L.B.T技术具有应用范围广[9]、灵敏度高、相关性好、反应速度快等优点,被广泛应用于环境监测及环境质量评价中。吴伟[10]等以明亮发光杆菌为指示生物,对不同水体中污染物的急性毒性进行了快速检测,其结果与鱼类毒性实验可互相替代,可应用于渔业水域的污染评价,实现对渔业水体的现场连续监测。乔鸿泽[11]采用发光细菌测定法估算了两城市污水对河道水体污染的程度,评价了工厂排放废水的毒性,并以此确定污染源监督管理中应优先治理的工厂(车间)废水。所以该法在工业废水的监督管理中有广泛的应用前景。于晓丽等[12]利用发光菌进行了8种单因子生物毒性实验,确定了金属离子、非金属离子对发光菌的半致死浓度。在此基础上,评价了某油田不达标采油污水的综合毒性,指出污水毒性主要是由污水中有机物产生的,并对有机化合物的致毒机理进行了探讨。近年来,利用发光菌测定法检测环境污染物急性毒性倍受重视,并以检测时间短,灵敏度高而被受世界各国广泛采用,我国于1995年也将这一方法列为水质急性毒性的检验标准方法(GB/T15441.1995)。随着现代仪器和
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