包被抗人CD3单克隆抗体对CIK细胞生长影响的研究.pdfVIP

检验医学与临床2012年2月第9卷第4期 LabM |n，! ! ! ：!! ： · 413 · · 论 著 · 包被抗人 CD3单克隆抗体对 CIK细胞生长影响的研究 王 岩 ，刘蓉芳 ，晁玉琴 (河南省驻马店肿瘤 医院：1．医学生物细胞室；2．检验科 463000) 【摘要】 目的 通过对比包被和未包被抗人 CD3单克隆抗体培养瓶 中的杀伤细胞(CIK细胞)生长状态及培 养一段时间后收集的细胞数，研究在临床常用培养 CIK细胞的方法上，后续增加对培养瓶进行包被抗人 CD3单克 隆抗体的预处理后 ，对 CIK细胞生长的影响。方法 提取健康者的外周血单个核细胞(PBMC)，无血清培养液调整 好细胞浓度，在 75cm 密封盖培养瓶 中等量加入包被和未包被抗人CD3抗体，以及 IFN一7。培养 24h后加入 CIK 混合刺激 因子 ，以后每天观察细胞的生长情况 ，根据细胞的生长情况进行传代扩增(扩增至未包被 的培养瓶 中)，第 12天收集细胞进行比较。结果 包被抗人 CD3抗体的75cm 密封盖培养瓶培养的CIK细胞，在培养第 3天即可 进行传代扩增，以后每天都可进行扩增；用未包被抗人CD3抗体 75cm。密封盖培养瓶培养的CIK细胞在第 5天才 可进行传代扩增 ，以后每隔 1d可 以进行扩增 ，第 12天收集的细胞总数未包被 的为 1．2×10。，包被 的为 3．3×1O。 结论 包被细胞因子抗人CD3单克隆抗体对正常条件培养的CIK细胞生长状态和较短时间内收获的CIK细胞总 量有很好的正影响 。 【关键词】 杀伤 细胞 ； 包被细胞 因子 ； 细胞生长状 态 DOI：10．3969／j．issn．1672-9455．2012．04．014 文献标志码 ：A 文章编号：1672—9455(2O12)04—0413一O2 Studyon influenceofmonoclonalantibodycoatedwithanti-humanCD3onCIK ceilsgrowth W_ANGYah ，LIURong fang ，CHAOYu—qin (1．MedicalBiologicalCells；2．DepartmentofLaboratory，ZhumadianTumorHospital， Zhumadian，Henan463000，China) [Abstract] Objective Tostudytheeffectsofmonoclonalantibodycoatedwithanti—humanCD3onqualityand quantityofCIK cellsculturedincultureflaskbycomparingthepretreatmentswithnotcoatedanti—humanCD3，based oncommonclinicalculturalmethodsofCIK cel1．Methods Toextractperipheralblood mononuclearcell(PBMC) from healthypeople，andadjustthecertainconcentrationsofserum-freecellculture，addthesameamountsofanti— bodycoatedwithanti～humanCD3andnotcoatedantibodyandsubsequentlyaddIFN一7in75cm sealedculturalflask． After24htreatment，CIK mixedstimulatingfactorwasadded，thegrowth statuswasobservedandrecordedevery— day．Thecellswerecollectedforcomparisonon12d．Resnlts CIK cellswithantibodycoatedbyanti—humanCD3be gantoamplifyafter3dandeverydayoftheamplification latter；CIK cellsnotcoatedwithanti—humanCD3antibody begantoamplifyonlyafter5d．Thetotalnumberofcollectedcel