NaCl浓度和茎环内的碱基结构对shRNA退火影响的研究.pdfVIP

生物 医学工程与l晦床 2010年3月第 l4卷第 2期 BME＆ClinMed，March2010，Vo1．14，No．2 一 l57一 doi：10．3969j／．issn．1009—7090．2010．02．019 ． 生物工程 ． NaCI浓度和茎环内的碱基结构 对 shRNA退火影响的研究 张 祥 ，张震宇 ，唐佩福 ，孔祥丽 。，黄 鹏 ，金萌萌 ，于爱平 。 摘 要 ：目的 优化 DNA寡核苷酸单链退火条件 ，提高单链 DNA寡核苷酸退火效率 ．加速 shRNA表达载体构建速度。方 法 将茎环内部碱基结构不同DNA寡核苷酸链在不同浓度 (50、100、150、200mmol／L)NaC1退火缓冲液中进行退火 ，通过琼 脂糖凝胶电泳观察 DNA寡核苷酸链在退火前后电泳速度 的变化 ．利用GeneTOOls分析软件对电泳图像进行分析比较退火效 率。结果 当退火缓冲液 中NaC1浓度为 200mmo]／L时，DNA寡核苷酸单链退火效率 明显提高．茎环内部碱基互补