不同冷冻方案对家兔卵巢组织卵泡细胞增殖活性的影响.pdfVIP

维普资讯 中国优生与遗传杂志2007年第 15卷第3期 ·95· 不同冷冻方案对家兔卵巢组织卵泡细胞 增殖活性的影响 孙丽君 ，朱桂金 。谭 丽 ，马丽影 (1．华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖中心，武汉 430030 2 郑州大学第二附属医院生殖中心，郑州 450003) 摘 要：目的 探讨不同冷冻方案对家兔卵巢组织卵泡细胞增殖活性的影响。方法 应用PROH慢速程序化冷冻及 DMSO+EG玻璃化冷冻方案冻存家兔卵巢组织，复苏后机械性分离卵泡，采用 H标记的胸腺嘧啶核苷掺入试验测定2—5 层颗粒细胞包裹的小次级卵泡 (小OGC组)及 5层以上颗粒细胞包裹的大次级卵泡 (大OGC组)的cpm值，并以新鲜组 为对照。结果 PROH组及DMSO+EG玻璃化组复苏后形态正常的小OGC的cpm值分别为2554．67±93．59及2510．67± 100．03，新鲜对照组为2507．00±25．94，两冷冻组与新鲜组比较 ，差异无显著性 (P0．05)；而各大OGC组的cpm值分 别为5784．00±188．95、5481．33±ll2．38及9629．00±265．64，两冷冻组与新鲜组比较，差异有显著性 (P0、05)；两冷 冻组间比较，大OGC及小OGC的cpm值均无显著性差异 (P0．05)。结论 (D两种冷冻方法对形态正常的小OGC的细 胞增殖活性无明显影响，这些卵泡复苏后体外培养及成熟可能为今后卵巢组织冷冻复苏体外培养的研究方向。②两种冷冻 方法使形态正常的大OGC细胞增殖活性受到明显抑制，冷冻复苏可能对颗粒细胞造成了损害。③两种冷冻方法对大小 OGC细胞增殖活性的影响相似，其具体机制 尚需进一步研究。 关键词：家兔；卵巢组织；冷冻保存 ；细胞增殖活性 中图分类号：R321．1 文献标识码：B 文章编号：1006—9534 (2007)03—0095—03 Effectsofdifferentfreezingmethodsontheproliferativecompetenceoffolliclecellsin rabbitovariantissue．SUN 12一 Jun ，ZHUGui一 ，l，TANLi2，MALi—Yi，lg．(1．ReproductiveCentre，ron~iHospital，ton# MedicalCollege，HuazhongU- niversityofScienceandTechnology，Wuhan，450030 2．ReproductiveCentreoftheSecond HospitalAffiliatedtoZhengzhouUniversi· ty，Zhengzhou，450003) Abstract：Objective：Investigatetheeffectsofdifferentfreezingmethodsontheproliferativecompetenceoffolliclecellsinrabbit ovariantissue．Method s：RbabitovariantissuewascryopreservedbyPROH procedureslow—freezingmetIlod andDMSO +EGvitrifica． tionmethod ．Afterthawed，mechanicallydissectfolliclesfrom ovariantissue．Through H —TdR uptakemehtod ，meaflui~htecpm of smallsecondaryfollicles(smallOGCgroup)wrappedupby2—5layersofgranulosaceHsnadhtecpmofbigsecondaryfollicles(big OGCgroup)wrappedupmnaylayersofg