HEV ORF3基因真核表达细胞系HepG2-ORF3的构建.pdfVIP

中国科技论文在线 HEV ORF3 基因真核表达细胞系 # HepG2-ORF3 的构建 梁焕斌，梁楚敏，古洪浪，纪方晓，张亮权，王衡，张桂红** 5 （华南农业大学兽医学院，广州，510642 ） 摘要：为了研究猪源戊型肝炎病毒 （swHEV ）ORF3 部分基因的抗原性，尝试通过 G418 的 筛选，建立出稳定表达 ORF3 蛋白的真核细胞系。试验通过设计引物，扩增 swHEV ORF3 部分基因片段，长度 360bp。使用pMD18-T 载体克隆，双酶切后插入 pcDNA3.1 真核表达 10 载体。质粒经双酶切鉴定阳性后，转染真核细胞系 HepG2 ，并进行 G418 筛选。筛选出 HepG2-ORF3 真核表达细胞系后 ，通过间接 免疫荧光检测其表达情况 ，同时进行 HepG2-O