抗游离前列腺特异性抗原(f2PSA)单克隆抗体的研制与应用.pdfVIP

( ) 田素娟等　抗游离前列腺特异性抗原 fPSA 单克隆抗体的研制与应用　第 2 期 1·27 · 抗游离前列腺特异性抗原(fPSA) 单克隆抗体的研制与应用① 田素娟 　郑蓬举 　徐海燕 　杨书豪 　刘昊　 　杨艳艳 　张 　燕 　张玉梅 (郑州博赛生物技术研究所 ,郑州 450001) 　　中国图书分类号 　R39233 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000484X( 2004) ( 　　前列腺特异性抗原 Prostate Specific Antigen , 细胞培养上清分别与包被的 fPSA 、PSAACT 进行间 PSA) 是目前公认的最有价值的前列腺癌肿瘤标志 接 ELISA 分析。②间接 ELISA 法 :杂交瘤上清分别 物1 。PSA 在血清中存在不同的分子形式 :游离前 与包被的 AFP 、CEA 、CA125 、CA153 、CA199 蛋白反 ( ) α 应 ,进行间接 ELISA 分析。③免疫组织化学染色 :用 列腺特异性抗原 fPSA 、前列腺特异性抗原与 1 ( ) ( ) 抗糜蛋白酶结合的结合型 PSA PSAACT 、前列腺特 稀释的 McAb 腹水 1 ∶200 为一抗 ,DaKo InVision 标 α ( ) 记抗鼠 IgG 为二抗对前列腺癌、前列腺增生组织、结 异性抗原和 2巨球蛋白形成的复合物 PSAA2M 等。但免疫学方法检测不出 PSAA2M , 因此 ,免疫分 肠癌、膀胱癌、胃癌、乳腺癌、鳞癌以及睾丸、纤维组 析检测血清中总的 PSA (tPSA) 为 fPSA 与 PSAACT 织、外周神经、结肠、淋巴组织等进行免疫组织化学 ( ) 染色。 的总和。前列腺特异性抗原 tPSA 在前列腺癌病 人血清中明显升高 ,在部分良性前列腺疾患病人血 153 　抗体识别抗原位点分析 　采用间接 ELISA 清中也有轻微升高 ,特别是在低水平升高的重叠范 法相加试验4 。 ( μ ) 154 　抗体亲和常数测定 　采用文献 5 的方法。 围内 4～10 gL ,两者难以区分 ,而测定 fPSA 并 计算 fPSAtPSA 的比值 ,极大地提高了两者的鉴别 155 　抗体稳定性试验 　杂交瘤细胞体外连续培 率2 。因此 , 对于前列腺疾患病人需同时检测 t 养 3 个月 、液氮冻存 1 年 ,分别制备腹水 ,间接 ELISA PSA 、fPSA 。我们从人精浆中纯化 PSA ,研制出针对 法测定其腹水效价。 fPSA 的单克隆抗体杂交瘤细胞株 , 并初步用于 f 156 　夹心法 ELISA 检测 fPSA 　选择亲和力高识 别不同抗原位点的两株 McAb 2D 、2E 作为包被、酶 PSA ELISA 试剂盒的研制。 1 4 标抗体 , 以方阵滴定法确定包被、酶标抗体的最佳稀 1 　材料与方法