酵母生产过程中芽孢杆菌污染的溯源——核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析.pdfVIP

2011年8月 食品研究与羿发 第32卷第8期 FoodResearchAndDevelooment 生物工程 -=== 114 酵母生产过程中芽孢杆菌污染的溯源 核糖体DNA扩增片段限制性 内切酶分析 张思璐 ，易安妮 ，王广 ，罗燕华：，吴希阳 (1．暨南大学食品科学与工程系，广东广州 510632；2．珠海紫英生物科技有限公司，广东珠海 519055) 摘 要：采用基于16SrDNA序列多样 l：·f@ARDRA技术(限制性酶切片段分析法)对活性干酵母生产过程的嗜热芽孢 杆菌污染进行分型和溯源 。通过对从酵母工厂各个生产环节 中的取样和成品中分离得到的23株芽抱杆菌进行 ARDRA分型，检测出有：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌，结果经细菌生理生化鉴定验 证。溯源分析生产过程的芽孢杆菌污染可能是来 自糖蜜高温灭菌过程未杀灭的嗜热芽孢 基于核酸检测的分子生物 学ARDRA技术的优点是快速、专一性强和灵敏度高，适于应对工业生产中出现的污染事件。 关键词：嗜热芽孢杆菌；ARDRA技术；16SrDNA；溯源鉴定；活性干酵母生产 ARDRA TechniquefortheDetectionofThermophilicBacillusContaminationinYeastFermentation ZHANGSi—lu，YIAn—ni，WANGGuang，LUOYan—hua，WUXi—yang (1．DepartmentofFoodScienceandEngineering，JinanUniversity，Guangzhou510632，Guangdong，China；2．Zhuhai ZiyingBiotechnologyCo．，Ltd．，Zhuhai519055，Guangdong，China) Abstract：UsedARDRA (AmplifiedRibosomalDNARestrictionAnalysis)techniquetoidentifybacilliisolates incontaminatedyeastfermentation．23thermophilicbacillusstrainssampledfl-om raw material，theprocessing lineandfinalproductswereanalysedbyARDRA，whichwerethenconfirmedbybiochemicalidentification． ResultsshowedthatthemainbacillipollutedareB．sublitis，B．1icheniformis，B．pumilusandB．cereus． Morevoer，resultsindicatedthatthemajorpollutantsarecanemolasseswhichmaynobeproperlysterilized duringtheprocessing，whichresultedinbacillussporescontaminatingthedownstream fermentation．Thisstudy demonstratedthatARDRA techniquecanbeusedarapidandaccuratemethodinidentificationandtracingthe bacillicontaminationinyeastfermentation． Keywords：ThermophilicBacillus；ARDRA；16SrDNA；identification；yeastfermentation 活性干酵母的生产过程 中的细菌污染 (如芽孢杆 实际指导意义2[1。随着现代分子生物学技术的发展 ，对 菌等)会显著降低成品干酵母的发酵力_11。尤其是嗜热 微生物的检测已不局限于对一般表型特征的鉴定 ，而 芽孢杆菌的孢子在原料灭菌过程控制不当时会残存而