舟山眼镜蛇细胞毒素1对K562细胞的抑制作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(7)：1297—1301 · 1297 · [文章编号] 1000—4718(2011)07—1297—05 舟 山眼镜蛇细胞毒素 1对 K562细胞的抑制作用 吴敏燕 ， 孔天翰 ， 唐 娅 ， 周升铭 ， 董伟华 (广州医学院病理生理教研室，广东 广州 510182；广州卫生学校 ，广东 广州510450) [摘 要] 目的：研究舟山眼镜蛇细胞毒素 1(CTX1)对人慢性粒细胞白血病细胞系K562的抑制作用。方 法：应用MTS方法和细胞计数法分别检测不同浓度 CTX1作用K562后的细胞相对活力和细胞数；PI染色后用倒 置荧光显微镜观察活细胞培养体系中K562细胞死亡情况；流式细胞术检测AnnexinV—FITC和PI双染色后细胞 凋亡情况。结果：不 同浓度 的CTX1(2、5、10mg／L)作用于 K562细胞 24h，细胞相对活办分别为 (90．50± 3．07)％、(58．33±3．08)％和 (27．43±1．99)％(与阴性对照组相 比，下同，P0．05)，作用24h时 CTX1对 K562 细胞的半数抑制浓度为5．77mg／L。CTX1(8mg／L)作用于K5626h、12h、24h，细胞数分别占对照组的(85．01± 3．54)％、(56．65±3．59)％和 (43．244-4．15)％，P0．05。随CTX1浓度增加和作用时间延长，荧光显微镜下观察 到被 PI染色的细胞数逐渐增多。CTX1(8mg／L)作用于K562细胞6h、12h、24h，细胞坏死率分别为 (0．73-4 0．06)％、(13．90-40．46)％和 (23．33±0．86)％；晚期凋亡率分别为 (16．27±0．21)％、(26．90±1．23)％和 (18．77 - i-0．81)％。结论：CTX1对K562细胞有明显抑制作用，主要引起K562细胞晚期凋亡和坏死。 [关键词] 舟山眼镜蛇；蛇毒液类；细胞毒素 1；K562细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．07．009 Inhibitoryeffectofcytotoxin1from NajaatraCantorvenom onK562 cells WU Min—yan。 KONG Tian—han ，TANG Ya ，ZHOU Sheng—ming ，DONG Wei— ， hua (。DepartmentofPathophysiology，GuangzhouMedicalCollege，Guangzhou510182，China；GuangzhouHealthSchool， Guangzhou510450，hCina．E—mail：weihuad@hotmail．corn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheinhibitoryeffectofcytotoxin1(CTX1)fromNajaatraCantorvenomon humna chronicmyeloidleukemiacelllineK562．M ETHODS：TheMTSnadcellcountingmethodswereusedtodetectcell relativeviabilityandcellnumbersofK562cellstreatedwithCTX1atdifferentconcentrations．Inthelivingculturesystem， thedeadanddyingcellsstainedbyP1wereobservedbyinvertedfluorescencemicroscope．AftertreatedwithCTX1，theap— optoticcellsweredetectedbyflowcytometry withannexinV—FITCandPIdoublestaining．RE