阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的间充质转化.pdfVIP

· l382· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011 Z(!)； = [文章编号] 1000—4718(2011)07—1382—07 阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的 间充质转化 王大鹏 ， 林洪丽 ， 沈 楠 ， 董 毳 ， 孙艳玲 ， 谢 华 ， 于长青 ， 王 楠 单路娟 (大连医科大学附属第一医院 肾内科，。中心实验室，辽宁大连 116011) [摘 要] 目的：探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化 (EMT)过程的影响。方法： 利用转化生长因子 B。(TGF—B。)建立肾小管上皮HK一2细胞 EMT的模型，应用RNAi技术沉默HK一2细胞的0【 一 1，6一岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达，光镜下观察FUT8基因沉默后细胞形态变化，免疫印迹及免疫细胞化学 方法测定细胞表型标记物蛋白E一钙黏蛋白(E—cadherin)、N一钙黏蛋白(N—cadhefin)、0【一平滑肌肌动蛋白(0【一 SMA)和成纤维细胞特异性蛋白一1(FSP一1)的表达变化，流式细胞仪测定细胞凋亡。结果：TGF—B。孵育48h 后，HK一2细胞失去原有的上皮细胞形态 ，呈现纤维细胞形态，纤维细胞表型标记蛋 白0【一SMA、FSP一1及N—cad— herin表达明显升高，而上皮细胞表型标记蛋白E—cadhefin表达明显下降，同时伴有 FUT8基因表达上调，细胞凋 亡增加，而提前转染FUT8siRNA能明显减弱上述这些反应。结论：FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK一2 细胞的EMT过程；阻断核心岩藻糖基化修饰 ，能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程。 [关键词] 核心岩藻糖基化；上皮细胞间充质转分化；核心岩藻糖基转移酶；HK一2细胞 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．07．024 Blockageofcorefucosylationcontributestoinhibitionofepithelialmesen- chymaltransition ofrenaltubularepithelialcells WANG Da—peng ，LIN Hong—n ，SHEN Nan ，DONG Cui，SUN Yan—ling ，XIE Hua ‘ ， YUChang—qing，WANGNan，SHANLu—juan (D‘epartmentofNephrology，CentralLaboratory，TheFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity，Dalian 116011，China．E—mail：linhongli@ ．163．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheroleofinhibitingcorefucosylationintheprocessofepithelialmesenchymal transition(EMT)inHK一2cells．METHODS：AnEMTcellmodelwithtransforminggrowthfactor—Bl(TGF—B1)was establishedandRNAitechniquewasusedtosilencetheexpressionofOf,一1，6一fucosyltransferase(FUTS)genewhichis responsibletocatalysationofcorefueose．Themorphological changesofHK 一2cellswereobservedunderlightmicroscope． TheepithelialcellmarkerE—cadhefinandfibroticcellmrakersN—cadhefn，fibroblast—specificprotein一1(FSP一1) andOt—smoothmuscleactin(0【一SMA)weredetecte