A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析.pdfVIP

ChjneseJoumalofVeterjnaryMedicine 中国兽医杂志 2OO8年 (第 44卷)第 12期 9 A亚群禽 白血病病毒 QC6281株的分离 与gp85基因序列分析 乔彦华，王永强，庞 平 ，金 铮 ，陈福勇 (中国农业大学动物医学院，北京 海淀 1oO193) 摘要：本试验通过病理剖检、接种DF1细胞、ELISA及 RT_PCR检测，从北京某种鸡场的疑似禽 白血病的父母代蛋鸡中 分离到 1株A亚群禽 白血病病毒，命名为QC6281。并根据 GenBank中已发表序列设计引物，扩增 env基因片段并将其克隆 到 pMD19一T-simple载体 中，扩增的 env基 因片段大小为 1239bp，其 中包括完整 的 gp85基 因，将 gp8 基 因亚克隆到 pMD19一T．simple载体中并测序，gp85基因大小为 1032bp，编码 344个氨基酸。将 env基因片段和推导的氨基酸序列与 GenBank中9株ALV的env基因相应序列做同源性分析并制作进化树图谱。发现QC628l与已发表的A亚群禽 白血病病毒 株该区域核苷酸同源性在 83．8 ～98 ，氨基酸 同源性在 86．9 ～98．5 。其 中与 Myel0blastosis．associatedvirustype1 (L1O922．1)同源性最高，核苷酸同源性为 98 ，氨基酸 同源性为 98．5 ；且与 Myeloblastosis—associatedvirustype1(L1O 922．1)亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性 以及致病性研究打下基础 。 关键词 ：禽 白血病病毒；gp85基 因；env基因；序列比较 中图分类号：S852．65 文献标识码：A 文章编号：O529—6O05(2008)12—00O9一O3 Is0lationofsubgroupA aVianleuk0sisVirusQC6281and partialsequencecomparisOn QIA0Yar卜hua，WANG Yong—qiang，PANG Ping，JIN Zheng，CHEN Fu—yong (CollegeofVeterinaryMedicine，ChinaAgricu1turalUniversity，Being1O0193，China) Abstract：Inthisst毒ldy，subgroupA avian leukosisviruswasisolatedbypathological8nat0my，DF_1 ceIlculture，ELlSA ，RT—PCR from parenteggchickensanddesignatedasQC6281．Accordingtothese— quencesofenv thatwaspublishedonGeneBank，apairofprimerswasdesigned．Partialenvgeneof QC6281wasamplifiedandclonedintopMD19一T—simplevectorandsequenced．Thenucleotidesequenceof envgenewas1239bp．A openreadingframeofgp85genewasincluded，whichwassubcl0nedtopMD19一 r_simplevectorandsequenced．Thenucleotidesequenceofgp85genewas1032bp，whichencodedapoly— peptideof344aminoacids．Thenucleotidesequenceandthededucedaminoacidsequenceofenvgeneof QC6281werec0mparedwith thepublishedsequencesofenvgeneofnineALV strains，andtheresuIts showedthatthehomologywithsubgroupA avian leuk0sisviruswasbetween83．8 ～98 innuc