抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4^＋Th1细胞功能性分化的影响.pdfVIP

中 大学学报 ‘学版 南 ( Sci)) 2一o…o8，33(…12) JCentSouthUniv Med 抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4+Thl细胞 功能性分化的影响 李沙陵。，戴霞红 ，范学工 ，李宁 ，刘洪波 ，代洪 ，周蓉蓉 (中南大学湘雅医院 1．传染科 ；2．输血科 ，长沙 410008) [摘要】 目的：观察抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠脾脏CD4 T细胞 rnI1分化的影响。方法 ：分离小 鼠脾脏淋 巴细胞 ，以免疫磁珠 阳性选择法纯化 CD4 T细胞 ，以荧光活化细胞分拣术分析其分选纯度 ，在 抗．CD3￡抗体 、抗．CD28抗体和 IL．12作用下，加入抑制性寡脱氧核苷酸或对照寡脱氧核苷酸培养 72h 后 ，用 ELIsA检测上清 IFN．和 IL．4的分泌 ，用RT-PCR检测细胞 —betmRNA的表达 。结果 ：抑制性寡 脱氧核苷酸能明显抑制 CD4 T细胞 IFN一 的分泌 ，促进 IL．4的分泌，同时还抑制 一betmRNA的表达 。 结论 ：在促 Th1细胞 因子刺激下 ，抑制性寡脱氧核苷酸对 小鼠体外 CD4 T细胞的功能性分化有作用， 既促进 Th2分化 ，又抑 制 Th1分化 。 [关键词] 抑制性寡脱氧核苷酸 ； Thl； 淋 巴细胞 ； T·bet [中图分类号] R392．1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-7347(2008)12-1089-06 Effectofsuppressiveoligodeoxynucleotideson thefunctional differentiation in CD4 Thllymphocytesinmiceinvitro LISha—ling’ DAIXia—hong ，FAN Xue—gong ，LINing ，LIU Hong-bo ‘ ， ， DAIHong ，ZHOU Rong—rong (1．Department Infection；2．DepartmentD，Transfusoin，XngyaHospital，CentralSouthUniversity，Changsha410078，China) Abstract： Objective Toexlporetheeffectofsuppressiveoligodeoxynucleotides(SupODN) on theTh1differentiation ofCD4 T splenetic lymphocytesin mice．M ethods Thesplenetic lym— phocytesofBALB／cmicewereseparated，andthenCD4 cellswerepurifiedwith immunemagnetic CD4 microbeads(positiveselection)．Thepurificationwasexaminedbyfluorescence-activatedcell sorter．CD4 cells，anti—CD38，anti—CD28，IL一12 and Sup ODN or controloligodeoxynucleotides (ConODN)wereCO-incubatedfor72h．IFN- andIL一4inthesupernatantweredetectedusing enzyme-linked immunosorbentassay．TheexpressionofT—betmRNA inCD4 cellswastestedbyre- versetranscriptionpolymerasechain reaction．Results Sup ODN could significantly inhibitthe re