转BADH基因紫花苜蓿山苜2号品种的抗盐性鉴定及系统选育.pdfVIP

植物学报 ChineseBulletinofBotany 2011，46(3)：293-301，，v ．chinbulIbotancom doi：10．3724／SP．J．1259．2011．00293 · 研究报告 · 转BADH基因紫花苜蓿山苜2号品种的抗盐性鉴定 及系统选育 燕丽萍’一，夏阳’，，毛秀红’，2刘翠兰’一，梁慧敏3 ’山东省林业科学研究院。济南 250014；山东省林木遗传改 良重点实验室，济南 250014；。江苏农林职业技术学院，句容 212400 摘要 利用转基因技术创造苜蓿新种质 已成为牧草新技术育种的重要组成部分。为了有效地从苜蓿转基因植株及其后代中 选育出优 良品种，深入研究转基因苜蓿的植物学性状及其产量 十分重要。以通过农杆菌介导技术获得的To代转BADH基因 苜蓿为试材，利用分子生物学方法对其 自交株系的世代群体连续进行抗盐性鉴定筛选和系统选 育，首次获得了具有抗盐碱 能力的转基因苜蓿稳定株系。同时，通过品种 比较实验、区域实验和生产实验，表明在不同盐碱地条件下，转BADH基因的 苜蓿植株产草量明显高于对照(未转基因的中苜1号)，生产实验的干草增产率介于13．11％一24．98％之间。上述结果表明，外 源 目的基因主要特性的遗传稳定，进而从实践上验证了转BADH基因工程操作的实用性。 关键词 紫花苜蓿，BADH基因，耐盐，选育，山苜2号，转化 燕丽萍，夏阳，毛秀红，刘翠兰，梁慧敏 (2011)．转BADH基因紫花苜蓿山苜2号品种的抗盐性鉴定及系统选育．植物学报 46．293-301． 紫花苜蓿(Medicagosafiva)蛋 白质含量高(含有 多数研究仅停留在实验室阶段，无法在生产实践中加 10多种维生素)，是一种优 良的豆科牧草，全球种植 以应用。本课题组从2000年开始，采用农杆菌介导技 面积约3．5x1O hm ，我 国现有种植面积达1．4xl0 术将 山菠菜(Atriplexhortensis)甜菜碱醛脱氢酶基凶 hm 。然而，土壤盐碱荒漠化是我国北方尤其是西北 (BADH)(李银心等，2000)导入苜蓿受体材料中苜1号 干旱地区苜蓿栽培的主要限制因子。鉴于紫花苜蓿多 的外植体中，获得了PCRI~N性植株(梁慧敏等，2005)。 数属盐碱敏感型(Osborneta1．，1997)，培育耐盐且 耐盐及抗旱实验结果表明，转基因植株(T1代)具有较强 抗旱性较强的紫花苜蓿新品种，是提高干旱地区紫花 的抗逆性(燕丽萍等，2009a，2009b；刘媛等，2009)。本 苜蓿人工草地产量及利用大面积盐碱荒地的根本途 文在上述研究的基础上，对转BADH基因的苜蓿后代 径之一。目前，生产实践中多采用传统的杂交育种手 (T1一T3代)植株进行PCR检测、耐盐性鉴定并对其进行 段选育苜蓿抗盐新品种，但该方法不仅耗时、费力， 遗传分离筛选，通过 自交和杂交选育出遗传稳定、综 而且收效甚微。因此，利用转基因技术培育苜蓿新种 合性状优 良且耐盐碱强的转基因苜蓿新品种。同时对 质 已成为牧草育种的重要组成部分。国内外已有关于 其主要生物学性状、产量及遗传稳定性进行跟踪调查， 紫花苜蓿转基因植株再生及其后代分析的报道 (Des． 以期为利用基因工程技术获得可应用于育种实践的 gagn~seta1．，1995；W eekseta1．，2008；Baoeta1．， 抗盐碱苜蓿提供研究基础，为在盐碱干旱地区及黄河 2009)。一些工作表明，外源基因导入植物细胞后随 三角洲大面积种植苜蓿提供新的种质资源 。 机整合到植物基因组中，转基因整合位点及其在细胞 中的拷贝数量影响着转基因植株的性状及其遗传稳 1 材料与方法 定性(Fr0mm eta1．，1990；王关林和方宏筠，2002)。 有效地从苜蓿转基因植株及其后代中选育出遗传稳 1．1 材料 定的优 良品种十分必要 。但该方面的研究尚未见报道， 在对To代转基因植株进行耐盐实验和分子生物学检 收稿 日期：2010-10-05；接受 日期：2011—02．07