高效液相色谱法测定毒清散中黄芩苷的含量.pdfVIP

沈《阳部队医药》 曹 · 93 · 高效液相色谱法测定毒清散中黄芩苷的含量 陈明明 陈 飞 摘要 为建立测定毒清散中黄芩苷的含量测定方法，采用高效液相色谱法，ODS色谱柱 (4mm×250mm， 5Ixm)；流动相为甲醇一四氢呋喃_一0．02mol·L～KH2PO4水溶液 (40：10：60)；流速：1．0ml·min～；检测波 长：278nm。结果表明HPLC法测定本品中黄芩苷可达基线分离，黄芩苷在0．8—81xg·ml 范围内具有 良好线 性关系 (r=0．9996)。5次测定平均回收率为99．47％，RSD为0．71％。结论：本方法简便、准确、重现性好 ，可 用于毒清散中黄芩苷的含量测定。 关键词 毒清散 黄芩苷 高效液相色谱法 毒清散由黄芩、金银花、板蓝根、浙贝母、桔梗 品溶液。另取不含黄芩的阴性对照品，同法制成 等 7味中药组方而成，具有解毒退热、清肺止咳之 阴性对照溶液 。 功效，临床应用治疗发热恶寒、喉核红肿等症，疗 2．2．3阴性样 品溶液 按处方条件制备不含黄芩 效确切。为了控制其质量，我们采用高效液相色 的样品，同法制成阴性样品溶液，备用。 谱法对处方中黄芩中所含黄芩苷进行了含量测 2．3高效液相分离图谱及保 留时间的确定 取对 定，效果满意，可以很好地控制该制剂的内在质 照品溶液、供试品溶液和阴性样 品溶液，在上述色 量 谱条件下测定，得色谱图(见附图)。结果显示阴 性液色谱 图在与黄芩苷对照品相同保留时间处未 1 仪器与试剂 显色谱峰，表明无干扰。 LC一4A高效液相色谱仪 (日本Shimadzu公 2．4线性关系的考察 精密吸取2．2．1对照品溶 司)；KromasilC】8柱 (4mm ×250mm，5Ixm)；甲醇 液 1、2、4、6、8、10ml，于 100ml量瓶中加 甲醇稀释 为色谱纯；磷酸、乙醇、四氢呋喃等试剂均为分析 至刻度 ，摇匀，各进样 10 l，按上述色谱条件测定 纯。黄芩苷对照品(批号：110715—200514中国 峰面积，以黄芩苷量 (Ixg)为横坐标，以峰面积为 药品生物制品检定所)。毒清散 (批号：090203， 纵坐标 ，得线性回归方程为 ：y=16253X 一2321，r 090305，090326沈阳军区某部制剂室生产)。 = 0．9996。结果表 明黄芩苷在 0．8I．Lg～8g · ml范围内具有良好线性关系。 2 方法与结果 2．5精 密度试验 精密 吸取对 照 品溶 液 2．1色谱条件及系统适用性试验 采用高效液相 (0．080mg·ml )，按上述色谱条件 ，重复进样5 色谱法。ODS色谱柱 (4mmX250mm，5txm)；流动 次，峰面积平均值 33441．74，RSD为0．81％。测 相为甲醇一四氢呋喃__o．02mol·L～KHPO 水 定结果表明，仪器精密度 良好。 溶液(40：10：60)；流速：1．0ml·min～；柱温： 2．6稳定性试验 取配制好 的对照品溶液在 0、 25~C；检测波长：278nm。理论板数按黄芩苷峰计 1、2、4、6、8h分别进样 10 l，记录峰面积，结果峰 算应不低于 3000。 面积的RSD为 1．62％。可见供试品溶液在8h内 2．2溶液的制备 稳定。 2．2．1对照品溶液 精密称取 6