姜曲海猪内源性逆转录病毒及亚型的检测与分析.pdfVIP

江苏农业科学 2011年第 39卷第4期 一 247一 高勤学，杨晓志，周 俊，等．姜曲海猪内源性逆转录病毒及亚型的检测与分析 [J]．江苏农业科学，2011，39(4)：247—249 姜曲海猪 内源性逆转录病毒及亚型的检测与分析 高勤学 ，杨晓志 ，周 俊 ，陶 勇 ，周春宝 ，谈永松 (1．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 225300；2．上海市农业科学院畜牧研究所 ，上海 201106) 摘要：为异种器官移植和抗病育种提供依据，观察猪内源性逆转录病毒 (PERV)在姜曲海猪基因组中的分布情况 及遗传特性。从姜曲海猪保种群中随机选择3O头母猪，采集耳组织样品，应用 PCR和RT—PCR技术分别检测 PERV 前病毒 DNA和mRNA，根据 env基因亚型env—A、env—B、env—C，鉴定每头猪携带的PERV亚型；同时，对 PERV的env 基因亚型进行扩增 、克隆、测序。结果表明，所检测的30头姜 曲海猪均带有 PERV前病毒 DNA，耳组织中均有 PERV 表达。所有个体均携带env—A、env—B、env—C等3种亚型，姜曲海猪 env—A、enu—B、env—C与其他猪种分别存在 1、 0和8个碱基差异；2个个体有2种基因型表达，28个个体有env—ABC基因型表达。说明姜曲海猪种群携带 PERV， 而且均具有转录活性，亚型全部是env—ABC；姜曲海猪 2种亚型存在基因多态性 ，从生物安全角度考虑 ，该猪种不适 宜作为异种移植供体。 关键词 ：内源性逆转录病毒；姜 曲海猪；亚型；抗病育种 ；异种移植 中图分类号：$858．28 文献标志码：A 文章编号 ：1002—1302(2011)04—0247—03 细胞移植已经成为一种治疗糖尿病、老年痴呆症等多种 排斥和生物安全性始终是异种移植面临的2个主要难题。自 疾病最有效的方法，但人类供体严重不足，异种移植成为生物 1997年Patience等首次发现猪 内源性逆转录病毒 (porcine 医学研究的新热点。猪是异种来源最适合的供体，但是免疫 endogenousretrovirus，PERV)能体外感染人 肾293细胞系… 以来 ，PERV成为猪研究的新热点。PERV不仅与异种移植生 收稿 日期 ：2011—04—22 物学安全性有关 ，还具有多重生物学效应。病毒易感性和繁 基金项 目：江苏省 自然科学基金 (编号：BK2008950)；上海市农业科 殖力都与其有密切的关系。PERV是以前病毒 DNA 的形式 技成果转化项 目(编号：093919N1500)；上海市科技兴农重点攻关 整合进宿主细胞基因组 中的，并能稳定遗传，属 C型病毒。 项 目[编号：(2008)第 7—1]。 它分为 gag、pol、env、5 UTR、3，_UTR等5个功能区。根据 作者简介 ：高勤学 (1976一)，男，安徽凤台人，博士，副教授，主要从事 env基因的差异又可以分为 3种亚型 ：env—A、env—B、 猪遗传育种研究。E—mail：transposonpig@gmail．corn。 env—C。我国具有丰富多彩的地方猪种质资源，猪种之间 通信作者：谈永松，博 士，研 究员 ，主要从事动 物遗 传育种研究。 PERV负载不平衡。寻找 PERV阴性猪及探索消除基 因组 E—mail：typine@ 163．corn。 PERV的技术手段是猪作为移植供体和试验动物研究的重要 (上接第246页) (5)：16—17． 著提高三黄鸡血清总脂肪和 LDL—C的含量，并有降低血清 [2]李启琳 ，李燕鹏 ，王士长．甘露寡糖替代抗生素对 肉鸡生产性能 甘油三脂和总胆固醇的趋势，但差异不显著。刘海英等研究 的影响[J]．安徽农业科学 ，2008，36(6)：2350，2356． 壳聚糖对艾维因肉鸡血脂代谢的影响时发现添加