Cx43基因启动子去甲基化与乳腺癌MDA-MB231细胞上皮间质转换的相关性研究.pdfVIP

中华肿瘤 防治杂志 2011年 2月第 18卷第 3期 CHINJCANCERPREVTREAT，February201l，Vo1．18 No．3 《实验研究／论著l 0x43基因启动子去 甲基化与乳腺癌 MDA—MB231 细胞上皮间质转换的相关性研究 赵修世 ， 王红梅 ， 孙静 ， 王琳 ， 李文通 1．潍坊医学院病理学教研室，山东 潍坊 261053 2．寿光市皮肤病防治站病理科，山东 寿光 262700 Relationshipbetweendemethylationofconnexin43genepromoterandepithelial—mesenchyma transitionjnbreastcancerMDA．MB231cells ZHAOXiu—shi ，WANGHong—mei，SUN Jing ，WANG Lin ，LIWen—tong 1．DepartmentofPathology，WeifangMedicalUniversity，Weifang261053，P．R．China 2．DepartmentofPathology，ShouguangProphylactico—TherapeticInstitutionofDermatogicDisease，Shouguang 262700，P．R．China 【摘要】 目的：探讨乳腺癌细胞 中连接蛋 [ABSTRACT] OBJECTIVE：Toexploretherelationshipbetween 白43(Cx43)基 因启动 子 甲基 化与乳腺癌上 Cx43methylationofconnexin43(Cx43)genepromoterandbreast 皮间质转化 (EMT)的关 系。方法 ：甲基 化 cancer epithelial—mesenchymal transition (EMT)． METH0DS： PCR检测 Cx43启动 子 甲基 化 的频 度 ；5一氮 Cx43promotermethylationfrequencywasdetectedbymethylation 杂 脱 氧 胞 苷 (5-Aza—dC)培 养 乳 腺 癌 PCR detection．MD-MBA-231cellsafterbeingtreatedby5-aza—de— M )【_MBA一231细胞后 ，反转录 PCR(RTPCR) oxycytidine(5一Aza—dC)，ReverseTranscription PCR (RT—PCR) 乳腺癌细胞 中Cx43mRNA，免疫荧光、蛋 wasusedtodetecttheexpressionofCx43mRNA ，Western blot 白质 印迹 法检 测 E—cadherin、波蛋 白(vimen— andimmunofluorescenceforthedetectionofCx43，E—cadherinand tin)及 Cx43蛋 白表达 ，甲基化 PCR检测启动 vimentinproteinexpression，Cx43promotermethylationfrequency 子 甲基化的变化。结果 ：在应用 5-Aza-dC处 wasdetectedbymethylationPCR detection．RESULTS：Beforethe 理前 ，M MBA-231Cx43基 因呈 甲基 化状 treatmentof5-Aza—dC， Cx43 gene ofM I)_MBA一231 cells was 态，将4．0／~mol／L的5一Aza—dC作 用 48h后 ， presented methylation status． Cx43 gene methylation status of 乳腺癌细胞 Cx43基 因 甲基化逆 转；Cx43 M )【_MBA一231cellswasmodulatedbv4．0 “mol／Iof5-Aza—dC mRNA表达水平增加 ，