实时荧光定量PCR检测鳜IgM mRNA标准品质粒的构建.pdfVIP

下载本文档

18
0
约1.8万字
约 4页
2017-09-12 发布于湖北
举报
版权申诉

实时荧光定量PCR检测鳜IgM mRNA标准品质粒的构建.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

第 28 卷第 6 期广东海洋大学学报 Vol.28 No.6. 2008 年 12 月 Journal of Guangdong Ocean University Dec. 2008 实时荧光定量 PCR 检测鳜 IgM mRNA 标准品质粒的构建 1,2 2 3 2 2 2 刘雨果，潘厚军，陈偿，巩华，石存斌，吴淑勤（1.广东海洋大学水产学院，广东湛江 524088；2.中国水产科学研究院珠江水产研究所，广东广州 510380； 3.中国科学院南海海洋研究所，广东广州 510380）摘要: 利用 SYBR Green I 荧光定量 PCR 技术，建立鳜 IgM-DNA 定量标准品的制备方法。从浸泡免疫后的鳜头肾中提取总 RNA 逆转录合成 cDNA，对目的片段进行 PCR 扩增、电泳纯化、T-A 克隆及测序鉴定。将所得预期质２ 8 粒梯度稀释后构建标准曲线并进行融解曲线分析。结果表明，当标准品的浓度在 3.29×10 ～3.29×10 拷贝/µL 时，２模板浓度与循环阈值（Ct ）间的线性关系良好，相关系数 r 达到 0.999；融解曲线分析显示具特异的单个峰，表明扩增产物特异性非常好。此法制备的重组质粒标准品可用于对鳜 IgM 基因的转录水平进行测定。关键词: 鳜；IgM 基因；实时荧光定量 PCR 中图分类号：Q78 + S942 文献标志码：A 文章编号：1673-9159（2008）06-0001-04 Construction of the Standards for Detecting IgM mRNA of Siniperca chuatsi with Real-time Quantitative PCR 1,2 2 3 LIU Yu-guo , PAN Hou-jun , CHEN Chang , 2 2 2 GONG Hua , SHI Cun-bin , WU Shu-qin （1.Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China; 2. Pearl River Fisheries Research Institute, CAFS, Guangzhou 510380,China; 3. South China Sea Institute of Oceanology, CAS, Guangzhou 510380, China） Abstract: A method to monitor t