RecA蛋白—互补单链DNA探针提高压电基因传感器灵敏度的实验研究.pdfVIP

维普资讯 · 916 · 实 医药杂志 2Oo4年 lO月第 2l卷第 lO期 PraejMel‘ Pham1．V0121,2004—10No．10 · 基础研究 · RecA蛋白一互补单链 DNA探针提高 压电基因传感器灵敏度的实验研究 昊 蓉 府伟灵 陈 鸣 (88医院，山东泰安 271000) 摘【 要】 目的 研究利用 RecA蛋白一互补单链 DNA探针与固定的肽核酸 (bis—PNA)探针相结合提高 压电基因传感器的灵敏度的可行性。方法 基因传感器阵列固定上针对乙肝病毒的bis—PNA探针 ，加入 靶 DNA与之反应 ，然后加入预先处理过的的RceA蛋 白一互补单链 DNA探针。结果 直接加入靶 DNA 所引起的频率改变为 15．83~7．31Hz，反应时间为45．16~12．87min，加入 RecA蛋 白一互补单链 DNA探针 (浓度为3．0mg／m1)，所引起的频率改变最为明显 ，为 l12．16~12．7Hz。结论 在反应体系中加入RecA蛋 白一互补单链 DNA探针 ，能有效地提高压电基因传感器的灵敏度，明显缩短反应体系时间。 关【键词】 压电性 基因传感器 肽核酸 RecA蛋白 灵敏度 【申囤分类号】 R318；Q7；R319 文【献标识码】A TheexperimentalstudyofsensifivRy improvementofpiezoelectricity genesensorby theprobeof RecA protein-complementary sin e strand DNA WU Rong， FU Welling， CHEN Ming． No． 88 HospitalofPLA，Taian271000，Cllina A【bstract] Objective Toimprovethesensitivityofpiezoelectricgenesensorbyincreasingistsurface loadonthebasisoftheprobeofRecA protein-complementarysinglestrandDNA andinvestigatethe optimalcondition in liquid phase．M ehtods Bis-PNA probefordetecting HBV was immobilized onhte surfaceof genesensorarray． Differentconcentrationsofthe RecA protein-complementary singlestrand DNA probes were added alter the bis-PNA probes were hybridized wiht corresponding targetDNA． Results When using targetDNA probes directly the change ofthe frequency nad the cost-time of reaction were obvious． they weir 112．16~12．7Hz and 17．74±5．33ntin respectively．Conclusion The sensitivity of piezoelectricity gene Sensorarray is impmv~ and the time ofprocedure is decreased signilicnaflybyusingtheprobe ofRecAprotein-complementarysinglestrandDNA inreactionsystem． K【eywords】 Genesensor Piezoelectricity Peptidenucleicacid RecA protein Sensitivity 目前大部分压电基因传感器所用的都是DNA 应的灵敏性是一严重的制约。本实验利用压电基因 探针 ，由于单链 DNA探针无法直接与靶 D