细胞骨架及相关蛋白在人牙周韧带细胞成骨分化过程中的表达模式.pdfVIP

8 中华 口腔医学研究杂志(电子版)2008年 1O月第2卷第 5期 ChinJstomato1Res(ElectmnicVersi0n)，0ct0ber2008，Vo1．2，No．5 ． 基 础 研 究 ． 细胞骨架及相关蛋白在人牙周韧带细胞 成骨分化过程中的表达模式 吴莉萍 韦曦 凌均柴 刘路 【摘要】 目的 探讨人牙周韧带细胞 (PDLCs)成骨分化过程中细胞骨架及相关蛋白的表达模 式及其可能的功能作用 方法 酶消化法培养PDLCs．免疫细胞化学染色检测 vimentin的表达：取 诱导前 (对照组)及矿化诱导 7、14和 21d的PDLCs。实时荧光定量 RT—PCR检测 vimentin、actin、 caldesnl0n(CaD)、tropomyosin(Tm)和 annexinA4mRNA的表达变化并进行统计分析，Westernblot检 测蛋 白表达 结果 PDICs表达丰富的vimentin：Vimentin、actin、CaD和TmmRNA的表达在诱导 7d组下调．诱导 14d组和21d组逐渐上调：AnnexinA4mRNA的表达在诱导 7d组表现为上调 ， 诱导 14d组和 21d组逐渐下调 ：Vimentin的mRNA表达在各组问差异均有统计学意义 (P 0．05)：CaD和Tm在诱导7d组与 14d组之间的mRNA表达差异无统计学意义(P0．05)，其余各 组间差异均有统计学意义(P0．05)：Actin和 annexinA4在对照组与诱导21d组之间的mRNA表 达差异无统计学意义 (P0．05)．其余各组间差异均有统计学意义 (P0．05)；Westernblot检测蛋 白表达显示类似的表达趋势 结论 在 PDLCs成骨分化过程中．一组细胞骨架及细胞骨架蛋 白相 关蛋 白呈现相似的表达变化．提示其参与调节PDLCs成骨分化。 【关键词】 牙周韧带细胞；成骨分化 ；细胞骨架蛋白 Expressionofthecytoskeletonproteinsandcytoskeleton-associatedproteinsinhumanperiodontal ligamentcellosteogenicdifferentiation f／Li—ping，WEIXi，LING Jun—qi，LIU Lu．Guanghua SchoolojStomatology，htshtituteojStomatologicalResearch，SunYat—senUniversity，Guangzhou 510055，China Correspondingauthor：LNIGJun—qi，Email：lin~q@mm1．sysu．edu．cn，Tel：020 A【bstract】 Objective Theexpressionofthecytoskeletonandcytoskeleton—associatedproteins wasinvestigatedtoexploreitspossiblefunctioninhumanperiodontalligamentcells(PDLCs)osteogenic differentiation．Methods PDLCsweredigestedandcultivatedbyasolutioncontainingcollagenasetype Ianddispase．TheexpressionofvimentininPDLCswereinvestigatedbyimmunocytochemistry．PDLCs wereproceededtoosteogenicinductionfor7一，14一and21一daysrespectively，andcellsbeforeinduction servedascontrols(0d)．Theexpressionsofvimentin，actin，caldesmon(CaD)，tropomyosin(Tm)and annexin A4 mRNAswere investigated by real—time fluorescence quantitative RT—PCR analysis，and statisticalanalysis wasperformed to compare the differencesofmRNA ex