转il-4基因甘蓝后代的遗传及表现分析.pdfVIP

北方 园艺2o12(o8)：133～137 ·生物技术 · 转 il一4基因甘蓝后代的遗传及表现分析 张 玮 滢，于 丽 杰 (黑龙江省普通高等学校植物生物学重点实验室，哈尔滨师范大学 生命科学与技术学院，黑龙江 哈尔滨 150025) 摘 要：利用农杆菌介导法将 il一4基因转入甘蓝品种 “中甘 11”，用已转化得到的 、T4代甘 蓝品种为试验材料，通过 PCR扩增、PCR—Southern杂交、蛋白质浓度测定和 EldSA技术，对 4 基因转化甘蓝的后代进行 了检测，并对 il-4基因在 、T4代甘蓝中的传递规律以及后代甘蓝植株 的田间表现进行了调查。结果表明：T3、T4代转 il一4基 因甘蓝阳性植株数较少，甘蓝中 4基因 出现性状分离。同时，田间调查表明，相对于对照组(非转基因)植株 ，转 il-4基因阳性植株的田问 抗病性下降，植株高度降低，结实率降低，单株结籽数减少，生长势等农艺性状降低 。 关键词：甘蓝 ；白细胞介素一4；分子检测 ；田间分析 中图分类号：S635．603．6 文献标识码：B 文章编号：1001--0009(2012)08--0133--05 甘蓝(Brassicaoleracea)为十字花科芸薹属 2a生植 为 白细胞介素一4。IL一4功能复杂，用途广泛，大小约为 物，又名结球甘蓝，在世界各地广泛种植，具有重要的经 15kD。IL，4的主要功能在于抑制细胞免疫，增强B细 济和实用价值。近年来，随着转基因植物不断深入的研 胞对T细胞的相符作用，促进体液免疫应答 ，特别是促 究，通过农杆菌介导的遗传转化已经取得 了一定的进 进IE反应，增强特异性和非特异性的杀伤功能[2]。同 展 1【]。白细胞介素一4(Interleukin，IL-4)是由T辅助细胞 时，在过敏性和感染性及 自身免疫性疾病、肿瘤等方面， 产生的具有多种生物学功能的一种淋巴因子，在 2O世 IL-4都具有重要的医疗价值 ]。 纪初被发现，1986年其基因克隆成功，国际上统一命名 黑龙江省普通高等学校植物生物学重点实验室利 用根癌农杆菌介导法将 白细胞介素一4基因转入甘蓝，对 第一作者简介：张玮滢(1986一)，女，在读硕士，现主要从事植物分 其 自交后代 、T4代植株进行分子生物学检测及遗传 子生物学研究工作。E-mail：zhangweiying860411@163．corn。 表达研究 ，为利用甘蓝作为生物反应器生产药用蛋白 责任作者 ：于丽杰(1961一)，女，博士，教授 ，现主要从事分子生物学 IL_4提供参考。 研 究工作 。E-mail：yul~ie1961@126．corn。 1 材料与方法 基金项目：黑龙江省普通高等学校骨干教师创新能力资助项 目； 黑龙江省 自然科学基金资助项 目((20014)；哈尔滨市学科后备带 1．1 试验材料 头人基金资助项 目(0071007002)。 受体品种为 “中甘 1l”，其种子来源为中国农业科学 收稿 日期 ：2011—12—23 院蔬菜花卉研究所。利用根癌农杆菌介导的携带 il一4 Research0nFactoryBreedingIlssueCultureTechnologyofLoniceraX tellmannianaSpaeth ZHANGHui-jie，WANG Li—ying ，YUAN Ting，SUN Hu